[發(fā)明專利]Tth DNA聚合酶突變體及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211666064.6 | 申請日： | 2022-12-23 |
| 公開（公告）號： | CN116286715A | 公開（公告）日： | 2023-06-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 肖曉文;王文朋;李可欣;孫艷妮 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京擎科生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/12 | 分類號： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/6806;C12P19/34;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京匯知杰知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11587 | 代理人： | 楊巍;柴春玲 |
| 地址： | 100176 北京市大興區(qū)北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | tth dna 聚合 突變體 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種Tth?DNA聚合酶突變體，其特征在于，所述突變體在Tth野生型聚合酶基礎(chǔ)上具有如下一組突變：S515K、I640F、S741G和L789F；D734G和M763T；或E617D、D734G和M763T，所述Tth野生型聚合酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
2.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子編碼權(quán)利要求1所述的Tth?DNA聚合酶突變體。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括：如SEQ?ID?NO:3所示的核苷酸序列或其簡并序列、如SEQ?ID?NO:5所示的核苷酸序列或其簡并序列、如SEQ?ID
NO:7所示的核苷酸序列或其簡并序列。
4.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體含有權(quán)利要求2或3所述的核酸分子。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的表達載體，其特征在于，構(gòu)建所述表達載體是通過將所述核酸分子連入基于T7啟動子的表達載體pET系列實現(xiàn)的。
6.一種宿主，其特征在于，所述宿主轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化權(quán)利要求4或5所述的表達載體；優(yōu)選地，所述宿主是大腸桿菌，培養(yǎng)溫度是16℃、24℃、30℃或37℃，培養(yǎng)時間是20h、12h、7h或3h；更優(yōu)選地，所述宿主是大腸桿菌，培養(yǎng)溫度是16℃，培養(yǎng)時間是20h。
7.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權(quán)利要求1所述的Tth?DNA聚合酶突變體、權(quán)利要求2或3所述的核酸分子、權(quán)利要求4或5所述的表達載體或權(quán)利要求6所述的宿主。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括進行DNA聚合所需的緩沖劑、引物。
9.一種DNA合成方法，其特征在于，所述方法包括使用權(quán)利要求1所述的Tth?DNA聚合酶突變體作為DNA聚合酶的步驟，或者使用權(quán)利要求7或8所述的試劑盒進行DNA合成的步驟。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于北京擎科生物科技有限公司，未經(jīng)北京擎科生物科技有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202211666064.6/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
