[發明專利]抗嚴重急性呼吸系統綜合征II型冠狀病毒SARS-COV-2的中和抗體

在審

• 申請號: 202211606677.0
• 申請日: 2021-10-20
• 公開（公告）號: CN116003584A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 劉密;王義鵬;刁璐;馬琳;鎮學初;龍亞秋
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;A61K39/42;A61P11/00;A61P31/14
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 王玉仙

本發明公開了一種抗嚴重急性呼吸系統綜合征II型冠狀病毒SARS?COV?2的中和抗體，屬于生物醫藥技術領域。本發明從COVID?19康復患者血液中提取外周免疫細胞，并從中篩選可以和新冠病毒抗原蛋白?刺突蛋白結合的B細胞，然后對以生產抗體的單個B細胞在單細胞水平上進行分析，獲得了B細胞內編碼中和抗體可變區重鏈和輕鏈的基因序列。這些序列即可用來體外重新構建和表達可中和新冠病毒的中和抗體，有望用于新冠病毒所引起的肺炎等疾病的治療和預防。

本申請是申請號為：202111222859.3，申請日為：2021年10月20日，申請名稱為：抗嚴重急性呼吸系統綜合征II型冠狀病毒SARS-COV-2的中和抗體的分案申請。

技術領域

本發明涉及一種抗嚴重急性呼吸系統綜合征II型冠狀病毒SARS-COV-2的中和抗體，屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

抗嚴重急性呼吸系統綜合征II型冠狀病毒(SARS-CoV?2)感染引起的肺炎(COVID-19)是嚴重傳染性疾病，并在全球范圍內造成了嚴重影響。尋找針對該病毒的有效治療方案是一種迫切需求。

中和抗體是指與病毒結合后能消除病毒感染能力的抗體，是當病原微生物侵入機體時由B淋巴細胞而產生的相應的抗體，是由適應性免疫應答細胞分泌的一種可溶性蛋白。病原微生物入侵細胞時需要依賴病原體自身表達的特定分子與細胞上的受體結合，才能感染細胞，并進一步擴增。中和抗體能夠與病原微生物表面的抗原結合，從而阻止該病原微生物黏附靶細胞受體，防止侵入細胞。病毒侵入人體之后，B細胞把中和抗體分泌到血液里，抗體與血液里的病毒顆粒結合，阻止病毒感染細胞，破壞病毒顆粒，這樣就把病毒“中和”掉了。由此可見，中和抗體在殺滅細胞外的游離病毒時起主要作用。

來自病毒感染治愈患者血液的某些特異性中和抗體具有中和病毒的作用，因而可用于感染性疾病的治療，使病毒喪失致病力。隨著抗體制備技術的進步，治療性抗體已逐漸在多種疾病的治療方面發揮了很好的效果。現有的疫苗如麻疹疫苗、脊髓灰質炎疫苗、乙肝疫苗、甲肝疫苗，都是使接種者產生中和抗體以預防病毒感染的。由于中和抗體可在病毒進入細胞之前破壞病毒并可清除體內細胞外的游離病毒，所以，基于病毒感染痊愈患者血液中的中和抗體可用于病毒感染的治療。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明從COVID-19康復患者血液中提取外周免疫細胞，并從中篩選可以和新冠病毒抗原蛋白-刺突蛋白結合的B細胞，然后對以生產抗體的單個B細胞在單細胞水平上進行分析，獲得了B細胞內編碼中和抗體可變區重鏈和輕鏈的基因序列。這些序列即可用來體外重新構建和表達可中和新冠病毒的中和抗體，有望用于新冠病毒所引起的肺炎等疾病的治療和預防。

本發明的第一個目的是提供一種抗嚴重急性呼吸系統綜合征II型冠狀病毒SARS-COV-2的中和抗體，包括：輕鏈可變區DNA序列，以及重鏈可變區DNA序列；

所述輕鏈可變區DNA序列的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1-5中的一種或多種組合；

所述重鏈可變區DNA序列的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.6-8中的一種或多種。

進一步地，所述的中和抗體為包含恒定區和可變區的完整抗體、只包含可變區的部分抗體或只包含可變區的嵌合抗體。

本發明的第二個目的是提供一種編碼所述的中和抗體的基因。

本發明的第三個目的是提供一種攜帶所述的基因的表達載體。

本發明的第四個目的是提供一種表達所述的中和抗體的重組細胞。

本發明的第五個目的是提供所述的中和抗體在制備治療肺炎COVID-19的藥物中的應用。

本發明的第六個目的是提供一種治療肺炎COVID-19的試劑盒，所述試劑盒內含有所述的中和抗體。

本發明的有益效果是：