[發明專利]標志物tRF-Val-CAC-024及其應用

在審

• 申請號: 202211601335.X
• 申請日: 2022-12-13
• 公開（公告）號: CN116067730A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 毛啟星;王慶林;董高超;夏文杰;梁楹寬;王輝;蔣峰
• 申請（專利權）人: 江蘇省腫瘤醫院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N21/64
• 代理公司: 江蘇瑞途律師事務所 32346
• 代理人: 李童;陳彬

本申請公開了標志物tRF?Val?CAC?024及其應用，屬于醫療器械技術領域。該tRF?Val?CAC?024為tRNA衍生片段，其序列為ACCGGGCAGAAGCACCA，該片段在惡性肺結節患者血漿中表達上調，可作為生物標志物用于鑒別良惡性肺結節。通過檢測受試者血漿中tRF?Val?CAC?024的表達水平，并與參考值比較，可以幫助臨床醫生精確識別早期肺腺癌，為臨床上合適的治療方案的選擇提供幫助。

技術領域

本申請屬于生物技術領域，具體涉及標志物tRF-Val-CAC-024及其應用。

背景技術

肺癌(lung?cancer)，包括肺腺癌、肺鱗癌、大細胞肺癌，以及小細胞肺癌，是全球發病率第二和死亡率第一的惡性腫瘤，已成為全球巨大醫療的負擔。目前，肺腺癌早期篩查主要依靠胸部CT，其影像學表現為單發或多發的肺結節，最終通過病理活檢確診。然而，對于早期肺結節良惡性鑒別，尤其是2cm以下的肺結節，尚缺乏一種理想的手段，主要依靠醫生的經驗，會導致不同水平的醫院間對肺結節的診療情況存在差異，存在良性誤診、惡性漏診等情況。因此，建立一種微創、早期、靈敏和方便的檢測手段是必要的。

轉運RNA衍生片段(tRNA-derived?fragments，tRFs)是一類由轉運RNA(tRNA)剪切形成的長度小于50nt的非編碼RNA。研究表明，tRFs并非tRNA隨機降解的產物，而是在特定的RNA剪切酶精確剪切下產生的，其異常表達往往與特定疾病病理狀態高度相關，并且其具有保守度高、穩定性好、較miRNA調控方式更為多樣等特點。

發明內容

1.發明目的

本申請的目的在于提供一種用于鑒別肺結節良惡性的生物標志物及其應用，該生物標志物為tRF-Val-CAC-024，其核酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，其在惡性肺結節患者血漿中的表達水平顯著高于良性肺結節患者，可以作為鑒別良惡性肺結節的生物標志物，可輔助臨床醫生精確識別早期肺腺癌，為臨床上選擇合適的治療方案提供幫助。

2.技術方案

為了達到上述發明目的，本申請所采用的技術方案如下：

本申請提供了核酸tRF-Val-CAC-024作為生物標志物在鑒別良惡性肺結節中的應用，該核酸為長度17nt的非編碼RNA，是由位于6號染色體基因的tRNA-Val-CAC-2-1的3’端降解后產生，其序列為ACCGGGCAGAAGCACCA(SEQ?ID?NO.1)，在惡性肺結節患者血漿中的表達水平顯著高于良性肺結節患者，可以作為鑒別良惡性肺結節的生物標志物。

進一步地，上述應用包括檢測受試者血漿樣品中tRF-Val-CAC-024的表達水平；將tRF-Val-CAC-024表達水平與預設值比較，高于預設值則肺結節為惡性的可能性高，否則肺結節為良性的可能性高。

本申請還提供了上述生物標志物tRF-Val-CAC-024在制備用于鑒別良惡性肺結節的產品中的應用。

本申請還提供了檢測上述生物標志物tRF-Val-CAC-024的試劑在制備用于鑒別良惡性肺結節的產品中的應用。

進一步地，上述產品包括試劑、試紙、試劑盒、基因芯片或高通量測序平臺，高通量測序平臺是一種特殊的診斷工具，隨著高通量測序技術的發展，對一個人的RNA表達譜的構建將成為十分便捷的工作，通過對比患者和正常人群的RNA表達譜，容易分析出與疾病相關的異常RNA，因此，在高通量測序中獲知tRF-Val-CAC-024的異常與肺癌相關也屬于tRF-Val-CAC-024的用途，同樣在本發明的保護范圍之內。

進一步地，上述檢測生物標志物tRF-Val-CAC-024的試劑包括實時熒光定量PCR檢測試劑。

進一步地，上述實時熒光定量PCR檢測試劑包括擴增tRF-Val-CAC-024的引物。