[發(fā)明專利]一種導致MCPH5型小頭畸形的致病基因ASPM復合雜合突變的應用及檢測試劑和應用

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• 申請日: 2022-12-14
• 公開（公告）號: CN116004801A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發(fā)明（設計）人: 曾橋;薛斌;李嬋藝;伊寧
• 申請（專利權）人: 湖南家輝生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 薛紅凡

1.一種基因ASPM復合雜合突變位點在制備MCPH5型小頭畸形診斷試劑或制備防治MCPH5型小頭畸形的藥物中的應用，所述致病基因ASPM復合雜合突變位點為ASPM:NM_018136.5:exon15:c.3692delC:p.P1231Lfs*3和ASPM:NM_018136.5:exon18:c.6684_6685delAA:p.R2230Kfs*8。

2.一種用于檢測MCPH5型小頭畸形的致病基因ASPM復合雜合突變位點的試劑，其特征在于，包括檢測致病基因ASPM突變位點c.3692delC的引物和檢測致病基因ASPM突變位點c.6684_6685delAA的引物；

所述檢測致病基因ASPM突變位點c.3692delC的引物包括核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示的ASPM-1F和核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示的ASPM-1R；

所述檢測致病基因ASPM突變位點c.6684_6685delAA的引物包括核苷酸序列如SEQ?IDNO:3所示的ASPM-2F和核苷酸序列如SEQ?ID?NO:4所示的ASPM-2R。

3.根據權利要求2所述試劑，其特征在于，還包括測序引物；

所述測序引物包括致病基因ASPM突變位點c.3692delC的測序引物和/或致病基因ASPM突變位點c.6684_6685delAA的測序引物；

所述致病基因ASPM突變位點c.3692delC的測序引物包括核苷酸序列如SEQ?ID?NO:5所示的ASPM-Seq1F和核苷酸序列如SEQ?ID?NO:6所示的ASPM-Seq1R；

所述致病基因ASPM突變位點c.6684_6685delAA的測序引物包括括核苷酸序列如SEQID?NO:7所示的ASPM-Seq2F和核苷酸序列如SEQ?ID?NO:8所示的ASPM-Seq2R。

4.一種MCPH5型小頭畸形診斷試劑盒，其特征在于，包括權利要求2或3所述試劑和PCR擴增試劑。

5.根據權利要求4所述試劑盒，其特征在于，所述PCR擴增試劑包括dNTP、10×PCR緩沖液、鎂離子和Tap聚合酶；

所述10×PCR緩沖液包含以下組分的水溶液：500mmol/LKCl、pH8.3的100mmol/LTris-Cl和15mmol/LMgCl₂。

6.權利要求2或3所述試劑在制備檢測MCPH5型小頭畸形的致病基因ASPM突變位點的試劑盒中的應用。

7.一種檢測致病基因ASPM復合雜合突變位點的引物在制備輔助診斷MCPH5型小頭畸形的試劑盒中的應用，所述致病基因ASPM復合雜合突變位點為ASPM:NM_018136.5:exon15:c.3692delC:p.P1231Lfs*3和ASPM:NM_018136.5:exon18:c.6684_6685delAA:p.R2230Kfs*8。

8.根據權利要求7所述應用，其特征在于，所述引物為權利要求2或3所述試劑。

9.根據權利要求7所述應用，其特征在于，所述輔助診斷MCPH5型小頭畸形的方法，包括以下步驟：用所述試劑盒檢測樣本中基因突變位點的基因型來診斷個體是否患有MCPH5型小頭畸形的風險：

當檢測基因型是“c.3692delC雜合子+c.6684_6685delAA雜合子”，則判斷ASPM基因存在復合雜合突變，個體為患者；

若檢測基因型為單個雜合突變“c.3692delC雜合突變”或“c.6684_6685delAA雜合突變”，則個體為攜帶者；

若檢測突變位點沒有發(fā)生突變，則判斷ASPM基因為野生型，個體是正常人。

10.根據權利要求7～9任意一項所述的應用，其特征在于，所述樣本為血液、羊水和活檢組織中的至少一種。