[發(fā)明專利]一種防治柑橘黃龍病病菌藥劑篩選方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211597769.7
• 申請(qǐng)日: 2022-12-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116098010A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張戈壁;雷翠云;傅翠娜;婁兵海;張松;張素英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西特色作物研究院
• 主分類號(hào): A01G13/00
• 分類號(hào): A01G13/00;A01G31/00;C12Q1/689
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 牟森

本發(fā)明涉及一種防治柑橘黃龍病病菌藥劑篩選方法，涉及農(nóng)林科學(xué)領(lǐng)域，利用栽培在含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液中的感染黃龍病病菌的柑橘苗，向所述的含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液里面根施篩選的藥劑，培養(yǎng)至少20天，后通過(guò)檢測(cè)柑橘苗殘留的藥劑濃度，及通過(guò)PCR檢測(cè)柑橘苗黃龍病病菌的數(shù)量，以此來(lái)評(píng)價(jià)藥效。本發(fā)明提出用水培法來(lái)進(jìn)行篩選防治柑橘黃龍病病菌藥劑，而且該方法簡(jiǎn)便、快速有效，20到40天內(nèi)就可以篩選出有效藥劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)林科學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種防治柑橘黃龍病病菌藥劑篩選方法。

背景技術(shù)

柑橘是世界第一大水果，面積和產(chǎn)量均居全球第一。我國(guó)的柑橘產(chǎn)業(yè)宏大，自2008年開(kāi)始柑橘產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，面積達(dá)到3046.2萬(wàn)畝，產(chǎn)量達(dá)到2331.26萬(wàn)噸，首次名列世界第一。據(jù)統(tǒng)計(jì)2020年廣西柑橘種植面積864.93萬(wàn)畝、產(chǎn)量1382.09萬(wàn)噸、產(chǎn)值346.45億元，已是全國(guó)第一，但目前廣西柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展面臨嚴(yán)重挑戰(zhàn)，造成這個(gè)局面主要原因還是與黃龍病有關(guān)。

柑橘黃龍病菌(CandidatusLiberibacter，Ca.L)屬于α–變型菌綱(α-Proteobacteria)韌皮部桿菌屬(Liberibacter)，是一種韌皮部專性寄生的革蘭氏陰性細(xì)菌，目前無(wú)法分離培養(yǎng)的病原菌。其引起的柑橘黃龍病是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重危害柑橘生產(chǎn)的重要病害之一。柑橘黃龍病菌可以感染所有柑橘品種和柑橘雜交種等蕓香科植物，在柑橘生長(zhǎng)周期的各個(gè)階段都能被其感染，并最終導(dǎo)致樹(shù)木死亡。

柑橘黃龍病與柑橘潰瘍病一樣都屬于細(xì)菌性病害，目前由于其病原無(wú)法像潰瘍病在實(shí)驗(yàn)室里能夠分離出來(lái)，造成無(wú)法用常規(guī)的方法來(lái)篩選藥劑，當(dāng)然這也與黃龍病所為害的地方有關(guān)。至今為止，由于沒(méi)有有效的篩選藥劑的方法，柑橘黃龍病的防治方法只能停留在“種無(wú)病苗、防木虱、砍病樹(shù)”的初級(jí)階段，造成很多感病的柑橘產(chǎn)區(qū)種植面積銳減，種植者的利益受到極大的影響，嚴(yán)重阻礙了柑橘產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種防治柑橘黃龍病病菌藥劑篩選方法。目的是提出用水培法來(lái)進(jìn)行篩選防治柑橘黃龍病病菌藥劑，而且該方法簡(jiǎn)便、快速有效，20到40天內(nèi)就可以篩選出有效藥劑。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：一種防治柑橘黃龍病病菌藥劑篩選方法，其包括如下步驟：利用栽培在含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液中的感染黃龍病病菌的柑橘苗，向所述的含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液里面根施篩選的藥劑，培養(yǎng)至少20天，后通過(guò)檢測(cè)柑橘苗殘留的藥劑濃度，及通過(guò)PCR檢測(cè)柑橘苗黃龍病病菌的數(shù)量，以此來(lái)評(píng)價(jià)藥效。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明采用栽培在含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液中的感染黃龍病病菌的柑橘苗的作為評(píng)價(jià)材料，通過(guò)在所述的含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液里面根施篩選的藥劑，只需通過(guò)檢測(cè)柑橘苗殘留的藥劑濃度，及通過(guò)PCR檢測(cè)柑橘苗黃龍病病菌的數(shù)量來(lái)評(píng)價(jià)藥效，在20-40天即可篩選出有效抗柑桔黃龍病病菌的化學(xué)藥劑。且提供的快速、有效的抗黃龍病病菌化學(xué)藥劑篩選方法，篩選得到的高效柑桔黃龍病病菌防控藥劑，可在生產(chǎn)上直接用于柑桔黃龍病病菌的化學(xué)防治藥劑，還可為防治柑桔黃龍病病菌的新型藥劑的研究與開(kāi)發(fā)提供理論參考。

在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還可以做如下改進(jìn)。

進(jìn)一步，其包括如下具體的步驟：

步驟1，苗木接毒：把栽培在含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液中的沒(méi)有感染黃龍病病菌的柑橘苗接種黃龍病病菌，得到感染黃龍病病菌的柑橘苗；

步驟2，根施藥劑：將步驟2得到的感染黃龍病病菌的柑橘苗的含有營(yíng)養(yǎng)液的水溶液里面根施篩選的藥劑，在光照強(qiáng)度3000-4000lux，環(huán)境溫度25±2℃條件下，培養(yǎng)至少20天，得到待檢測(cè)的柑橘苗；

步驟3，藥效評(píng)價(jià)：檢測(cè)步驟2得到的待檢測(cè)的柑橘苗的根部及頂葉的殘留的藥劑濃度，及通過(guò)PCR檢測(cè)柑橘苗的根部及頂葉的黃龍病病菌的數(shù)量，以此來(lái)評(píng)價(jià)藥效。