[發明專利]一種華山新麥草2Ns染色體特異KASP分子標記引物及其應用在審
| 申請號： | 202211595374.3 | 申請日： | 2022-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN116144824A | 公開（公告）日： | 2023-05-23 |
| 發明（設計）人： | 張浩;曾春艷;康厚揚;朱微;徐黎黎;曾建;王益;凡星;沙莉娜;張海琴;吳丹丹;周永紅 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04 |
| 代理公司： | 成都知棋知識產權代理事務所(普通合伙) 51325 | 代理人： | 馬曉靜 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 華山 麥草 ns 染色體 特異 kasp 分子 標記 引物 及其 應用 | ||
1.一種華山新麥草2Ns染色體特異KASP分子標記引物，其特征在于，該分子標記引物包含F-FAM、F-HEX、R，其核苷酸序列依次分別如SEQIDNO.1、SEQ?ID?NO.2和SEQ?ID?NO.3所示。
2.由權利要求1所述的KASP分子標記引物所擴增的KASP標記序列，其特征在于，該KASP標記序列的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示。
3.一種華山新麥草2Ns染色體的基因分型方法，其特征在于，該方法采用如權利要求1所述的KASP分子標記引物對待測株系的基因組DNA進行PCR擴增。
4.根據權利要求3所述的基因分型方法，其特征在于，所述的PCR擴增條件如下：
PCR反應體系為10μL：200ng/μL的DNA模板1μL，10μM的混合引物1.4μL，2×KaspMasterMix5μL，ddH2O2.6μL；
PCR反應程序為：95℃10min；95℃20s，61℃45s，10個循環，每個循環降低0.6℃；95℃20s，55℃45s，32個循環；25℃1min；
其中，所述混合引物的體系為100μL：包含F-FAM和F-HEX引物各12μL，R引物30μL，H2O46μL。
5.一種用于鑒定華山新麥草2Ns染色體的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包含如權利要求1所述的KASP分子標記引物。
6.如權利要求1所述的KASP分子標記引物在以下任意一種中的應用：
①檢測華山新麥草2Ns染色體；
②檢測含有華山新麥草2Ns染色體的產品；
③追蹤華山新麥草2Ns染色體；
④追蹤含有華山新麥草2Ns染色體的產品；
⑤分子標記輔助選擇育種；
⑥制備分子標記輔助選擇育種的產品；
⑦小麥分子育種；或
⑧制備小麥分子育種的產品。
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