[發明專利]大盤龍七藥材的指紋圖譜及多成分分析在其質量控制中的應用

在審

• 申請號: 202211545754.6
• 申請日: 2022-12-02
• 公開（公告）號: CN115980208A
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 任慧;陳志永;崔小敏;胡靜;魯文靜;李寧;曲彤
• 申請（專利權）人: 陜西省中醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/36;G01N30/54;G01N30/74
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 于躍

1.一種大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜，其特征在于當HPLC色譜條件如下時，所述大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜基本與圖1一致；

HPLC色譜條件如下：

色譜柱為Agilent?5TC-C₁₈色譜柱，規格：250mm×4.6mm，5μm；

流動相：乙腈為A相，0.1％磷酸水溶液為B相；

梯度洗脫程序

流速：1.0mL·min^-1；柱溫：25℃；檢測波長：275nm；進樣量10μL。

2.權利要求1所述的大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜，其特征在于所述大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜基本與圖1一致，具有14個特征指紋色譜峰，其中峰1為熊果苷，峰2為沒食子酸，峰3為巖白菜素，峰5為兒茶素，峰7為4-O-沒食子酰巖白菜素，峰9為11-O-沒食子酰巖白菜素，峰12為兒茶素沒食子酸酯。

3.權利要求1-2任一項所述的大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜在大盤龍七藥材質量控制、成分分析中的應用。

4.權利要求1-2任一項所述的大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜在大盤龍七藥材質量控制中的應用，其特征在于所述應用包括如下步驟：

(1)將大盤龍七藥材粉碎，加入甲醇溶液，超聲處理，微孔濾膜過濾后，得供試品溶液；

(2)取步驟(1)得到的供試品溶液，經HPLC檢測，得供試品的HPLC圖，其中色譜條件如下：

色譜柱為Agilent?5TC-C₁₈色譜柱，規格：250mm×4.6mm，5μm；

流動相：乙腈為A相，0.1％磷酸水溶液為B相；

梯度洗脫程序

流速：1.0mL·min^-1；柱溫：25℃；檢測波長：275nm；進樣量10μL

(3)將步驟(2)得到的供試品的HPLC色譜圖與本發明所述的大盤龍七藥材的HPLC指紋圖譜比較，相似度在0.92以上的大盤龍七藥材為合格產品。

5.權利要求4所述的應用，其特征在于步驟(1)中優選粉碎后過60目篩，甲醇溶液優選體積分數60％的甲醇溶液，超聲時間優選20-40min，微孔濾膜優選0.22μm濾膜或0.45μm濾膜。

6.一種大盤龍七藥材的成分分析方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：

(1)7種對照品混合溶液的制備：

取熊果苷、沒食子酸、巖白菜素、兒茶素、4-O-沒食子酰巖白菜素、11-O-沒食子酰巖白菜素、兒茶素沒食子酸酯對照品適量，精密稱定，加60％甲醇水溶液配制成質量濃度分別為530、150、520、300、96、110、103μg/mL的混合對照品溶液；

(2)步驟(1)中各對照品標準曲線的制作：

分別精密量取混合對照品溶液0.1，0.5，1.0，5.0，10.0mL置10mL量瓶中，加60％甲醇稀釋至刻度，用0.45μm微孔濾膜濾過后進行HPLC檢測，以各對照品的質量濃度(x，μg/mL)為橫坐標，峰面積值(y)為縱坐標，通過計算，得線性方程，如下表：

7種成分的線性關系

(3)供試品溶液的制備：將大盤龍七藥材粉碎，加入甲醇溶液，超聲處理，微孔濾膜過濾后，得供試品溶液；

(4)取步驟(3)得到的供試品溶液，經HPLC檢測，根據熊果苷、沒食子酸、巖白菜素、兒茶素、4-O-沒食子酰巖白菜素、11-O-沒食子酰巖白菜素、兒茶素沒食子酸酯對照品的濃度及其在指紋圖譜中的保留時間及步驟(2)中的線性方程計算大盤龍七藥材中熊果苷、沒食子酸、巖白菜素、兒茶素、4-O-沒食子酰巖白菜素、11-O-沒食子酰巖白菜素、兒茶素沒食子酸酯的含量。