[發明專利]一種戊二醛癸甲溴銨溶液的制備方法

在審

• 申請號: 202211540720.8
• 申請日: 2020-12-10
• 公開（公告）號: CN115918657A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 周應培;劉繼根;王洋
• 申請（專利權）人: 湖南道勤生物科技有限公司
• 主分類號: A01N35/02
• 分類號: A01N35/02;A01N33/12;A01N25/30;A01N25/22;A01N25/02;A01P1/00;A01P3/00
• 代理公司: 北京騰遠知識產權代理事務所(普通合伙) 11608
• 代理人: 趙鑫鑫

1.一種戊二醛癸甲溴銨溶液的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1、稱取：稱取各原料，原料成分為戊二醛4-7％、癸甲溴銨4-7％、高碳脂肪醇聚氧乙烯醚0.2-2％、丙三醇6-20％和余量去離子水；

S2、混合物A的制備：將戊二醛和癸甲溴銨混合，攪拌均勻，得混合物A；

S3、混合物B的制備：將脂肪醇聚氧乙烯醚和丙三醇加入60ml去離子水中，然后加入混合物A，攪拌混勻后得到混合物B；

S4、戊二醛癸甲溴銨溶液的制備：調節步驟S2所得混合物B的pH值為5.4-6.6，加入去離子水定容至100ml，得到戊二醛癸甲溴銨溶液；

所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于根據使用場景進行不同濃度的稀釋消毒；

所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于100％殺滅大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌的最大水溶液稀釋倍數為1:2000，用于100％殺滅枯草芽孢桿菌最大水溶液稀釋倍數為1:1000。

2.根據權利要求1所述的一種戊二醛癸甲溴銨溶液的制備方法，其特征在于，還包括：所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于對PRRSV進行殺滅實驗；所述殺滅實驗的步驟包括：

將所述戊二醛癸甲溴銨溶液分別稀釋100、500和1000倍，與病毒懸液以9:1的比例混合，分別作用10、30、60min，然后分別與細胞維持液以1:9的比例混合，再用維持液做10倍梯度稀釋，將每個稀釋度的混合液一次接種到長成單層細胞的細胞培養板中，即PRRSV混合液接種到Marc-145細胞中，PRV混合液接種到BHK-21細胞中；

將每個所述所述戊二醛癸甲溴銨溶液的試樣接種4個孔，每孔0.1mL，用只加0.1mL細胞維持液到Marc-145和BHK-21細胞中作為陰性對照；

用細胞維持液將PRRSV和PRV病毒懸液進行10倍梯度稀釋，然后將每個稀釋度的病毒懸液，依次對應接種到長成單層細胞的細胞培養板中，即PRRSV混合液接種到Marc-145細胞中，PRV混合液接種到BHK-21細胞中；每個試樣接種4個孔，每孔0.1mL；

將接種好的培養板置于37℃含5％CO₂的培養箱中靜置吸附1h，待病毒吸附于細胞中后棄掉殘余病毒標本液，加入0.2mL新鮮細胞維持液，置CO₂培養箱中繼續培養，每天用倒置顯微鏡觀察細胞生長情況，連續觀察5-7天，待有異變的細胞其異變不發展，而對照細胞完好時，計數并記錄，得到實驗結果結果。

3.根據權利要求1所述的一種戊二醛癸甲溴銨溶液的制備方法，其特征在于，所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于在-35～0℃下100％殺滅大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌和枯草芽孢桿菌。

4.根據權利要求1所述的一種戊二醛癸甲溴銨溶液的制備方法，其特征在于，所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于100％殺滅致病性藍耳病病毒和偽狂犬病毒；所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于100％殺滅致病性藍耳病病毒的最大水溶液稀釋倍數為1:1000；所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于100％殺滅口偽狂犬病毒的最大水溶液稀釋倍數為1:500。

5.根據權利要求1所述的一種戊二醛癸甲溴銨溶液的制備方法，其特征在于，所述戊二醛癸甲溴銨溶液用于地磅和豬舍外圍稀釋倍數為1：2000，用于豬場內和車輛稀釋倍數為1:1000。