[發(fā)明專利]一種提取微生物DNA的試劑盒及其使用方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211535546.8 | 申請日： | 2022-11-30 |
| 公開（公告）號： | CN115851701A | 公開（公告）日： | 2023-03-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 孫梓健;涂波;康杰;丁澤琴 | 申請（專利權(quán)）人： | 成都羅寧生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 重慶莫斯專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50279 | 代理人： | 張伶波 |
| 地址： | 610052 四川省*** | 國省代碼： | 四川;51 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 提取 微生物 dna 試劑盒 及其 使用方法 | ||
1.一種提取微生物DNA的試劑盒，其特征在于，包括裂解液和平衡液，
所述裂解液包括異硫氰酸胍、5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、RNaseA、聚乙烯吡咯烷酮、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、溴酚紅和二甲苯青FF；
所述平衡液包括3-(2-氨基乙基氨基)丙基三甲氧基硅烷，1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三鈉和三羥甲基氨基甲烷。
2.如權(quán)利要求1所述的提取微生物DNA的試劑盒，其特征在于，
所述裂解液的pH為5.8～6.4。
3.如權(quán)利要求2所述的提取微生物DNA的試劑盒，其特征在于，
所述平衡液的pH為8.6～10。
4.如權(quán)利要求3所述的提取微生物DNA的試劑盒，其特征在于，
所述裂解液包括5M異硫氰酸胍、0.001％～12％的5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、0.001％～10％的2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、0.01mM RNaseA、0.5％聚乙烯吡咯烷酮、100～200mM的2-(N-嗎啉代)乙磺酸、0.1～0.5％的溴酚紅、0.01～0.5％的二甲苯青FF。
5.如權(quán)利要求4所述的提取微生物DNA的試劑盒，其特征在于，
所述平衡液包括0.01～15％的3-(2-氨基乙基氨基)丙基三甲氧基硅烷，0.25％的1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三鈉、50～200mM的三羥甲基氨基甲烷。
6.一種提取微生物DNA的試劑盒的使用方法，采用權(quán)利要求5所述的提取微生物DNA的試劑盒，其特征在于，包括以下步驟：
將0.05g～0.1g生物樣本與0.1ml裂解液充分混勻，并渦旋振蕩后室溫靜置1分鐘，得到混合溶液；
向所述混合溶液中加入0.2ml平衡液，充分混勻后室溫靜置10分鐘，得到粗提液；
將所述粗提液于15000xg離心力條件下離心1分鐘，取上清液，得到提取微生物。
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