[發(fā)明專利]一種灰肉色鏈霉菌0728-09及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211522765.2
• 申請日: 2022-11-30
• 公開（公告）號: CN116496923A
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王輝;裴嘉祺;汪輝
• 申請（專利權(quán)）人: 南京燦辰微生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01N63/28;A01P3/00;C12R1/465
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種灰肉色鏈霉菌0728-09，其特征在于：分類命名為灰肉色鏈霉菌Streptomyces?griseoincarnatus?，該菌株已于2022年6月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.25117。

2.如權(quán)利要求1所述灰肉色鏈霉菌0728-09的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）取防城港區(qū)域海水，采用無菌水對海水進行梯度稀釋：10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶，每個梯度稀釋液取0.1ml涂布在固體培養(yǎng)基上，30℃培養(yǎng)5-7天；

（2）挑取不同菌落，劃線于固體培養(yǎng)基上，置于30℃培養(yǎng)3-5天；觀察分離菌落是否純化；若有雜菌，重復(fù)該步驟直至純培養(yǎng)；

（3）將上述純化后的菌株接種于液體培養(yǎng)基中，50-100rpm，30℃振蕩培養(yǎng)3-5天；

（4）取1ml上述菌液接種于20ml指數(shù)生長的無菌球形棕囊藻培養(yǎng)液中，于20±1℃，12h光照，12h黑暗，2400lux光照強度條件下，培養(yǎng)2天，液體培養(yǎng)基為對照加入藻液中，分別設(shè)置3個平行，檢測葉綠素a含量，判斷藻細胞的數(shù)量，從而篩選出有抑藻活性最強菌株為灰肉色鏈霉菌0728-09。

3.如權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，所述固體培養(yǎng)基組分包括：硝酸鉀：1.0g，磷酸氫二鉀：0.5g，硫酸鎂：0.5g，氯化鈉：0.5g，硫酸亞鐵：0.01g，可溶性淀粉：20.0g，瓊脂：15.0g，純化水1000ml。

4.如權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基組分包括：硝酸鉀：1.0g，磷酸氫二鉀：0.5g，硫酸鎂：0.5g，氯化鈉：0.5g，硫酸亞鐵：0.01g，可溶性淀粉：20.0g，純化水1000ml。

5.權(quán)利要求1所述的灰肉色鏈霉菌0728-09在球形棕囊藻治理中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，將灰肉色鏈霉菌0728-09進行發(fā)酵培養(yǎng)得到灰肉色鏈霉菌菌液，并將所述菌液應(yīng)用于球形棕囊藻治理。

7.一種制備權(quán)利要求6所述灰肉色鏈霉菌菌液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

將灰肉色鏈霉菌接入固體斜面培養(yǎng)基中進行活化，培養(yǎng)溫度為30-37℃，靜置培養(yǎng)2-4d；活化后的固體平板菌株接入一級種子培養(yǎng)基中，進行一級種子擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30-37℃，轉(zhuǎn)速100-200rpm，培養(yǎng)3-7d；按1-5％的接種量將一級種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30-37℃，轉(zhuǎn)速50-100rpm，培養(yǎng)3-7d，收集菌液備用。

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述固體平板培養(yǎng)基中的組分包括：可溶性淀粉1-3%、瓊脂粉1-2%、硝酸鉀0.05-0.2%、磷酸氫二鉀0.025-0.075%、硫酸鎂0.025-0.075%、氯化鈉0.025-0.075%、硫酸亞鐵0.0005-0.0015%；優(yōu)選為可溶性淀粉2%、瓊脂粉1.5%、硝酸鉀0.1%、磷酸氫二鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、氯化鈉0.05%、硫酸亞鐵0.001%；優(yōu)選為可溶性淀粉2%、瓊脂粉1.5%、硝酸鉀0.1%、磷酸氫二鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、氯化鈉0.05%、硫酸亞鐵0.001%。

9.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述一級種子培養(yǎng)基中的組分包括：可溶性淀粉1-3%、硝酸鉀0.05-0.2%、磷酸氫二鉀0.025-0.075%、硫酸鎂0.025-0.075%、氯化鈉0.025-0.075%、硫酸亞鐵0.0005-0.0015%；優(yōu)選為可溶性淀粉1.5%、硝酸鉀0.1%、磷酸氫二鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、氯化鈉0.05%、硫酸亞鐵0.001%。

10.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基中的組分包括：可溶性淀粉1-3%、硝酸鉀0.05-0.2%、磷酸氫二鉀0.025-0.01%、硫酸鎂0.025-0.075%、氯化鈉0.025-0.075%、硫酸亞鐵0.0005-0.003%；優(yōu)選為可溶性淀粉2%、硝酸鉀0.1%、磷酸氫二鉀0.06%、硫酸鎂0.05%、氯化鈉0.05%、硫酸亞鐵0.0012%。