[發明專利]一種靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 202211463357.4
• 申請日: 2022-11-22
• 公開（公告）號: CN115746829A
• 公開（公告）日: 2023-03-07
• 發明（設計）人: 胡佳;吳紅波;劉派
• 申請（專利權）人: 無錫代際生物科技有限公司
• 主分類號: C09K11/02
• 分類號: C09K11/02;C09K11/65;B82Y20/00;B82Y30/00;G01N21/64
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 靳浩

1.一種靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、制備熒光碳量子點：

S1-1、將N-烷基葡萄糖酰胺、葉酸加入到超純水與乙醇的混合液中，超聲處理，得到前驅液；

S1-2、將前驅液轉移到聚四氟乙烯襯底的反應釜中，加熱反應；

S1-3、反應結束后冷卻至室溫，產物過濾，濾液離心，離心所得固體真空干燥，得到熒光碳量子點；

S2、在熒光碳量子點上修飾N,N-二甲基乙二胺：

S2-1、將步驟S1制備的熒光碳量子點加入溶劑中，超聲處理，得到混合物A；

S2-2、將鄰苯二胺和活化劑加入溶劑中，攪拌,得到混合物B；

S2-3、將混合物A與混合物B混合，加熱下攪拌回流，反應結束后將所得產物加入乙醇中，離心，離心所得固體下真空干燥，得到經修飾N,N-二甲基乙二胺修飾后的熒光碳量子點，即所述染色化合物。

2.根據權利要求1所述的靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，所述N-烷基葡萄糖酰胺為N-十六烷基葡萄糖酰胺。

3.根據權利要求2所述的靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中的活化劑為氯化亞砜,溶劑為乙腈。

4.根據權利要求3所述的靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S1具體包括：

S1-1、將N-十六烷基葡萄糖酰胺、葉酸加入到超純水與乙醇的混合液中，超聲2-10min，得到前驅液；其中，超純水與乙醇的體積比為1:4-1:1；

S1-2、將前驅液轉移到聚四氟乙烯襯底的反應釜中，150-220℃下反應8-20h；

S1-3、反應結束后冷卻至室溫，產物用0.14-0.35μm的濾膜過濾，濾液在7000-15000rpm下離心3-20min，離心所得固體在45-70℃下真空干燥，得到熒光碳量子點。

5.根據權利要求4所述的靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S1具體包括：

S1-1、將N-十六烷基葡萄糖酰胺180mg、葉酸150mg加入到120mL超純水與乙醇的混合液中，超聲5min，得到前驅液；其中，超純水與乙醇的體積比為3:7；

S1-2、將前驅液轉移到150mL的聚四氟乙烯襯底的反應釜中，180℃下反應12h；

S1-3、反應結束后冷卻至室溫，產物用0.20μm的濾膜過濾，濾液在12000rpm下離心10min，離心所得固體在55℃下真空干燥，得到熒光碳量子點。

6.根據權利要求5所述的靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S2具體包括：

S2-1、將步驟S1制備的熒光碳量子點加入乙腈中，超聲1-8min，得到混合物A；

S2-2、將鄰苯二胺和氯化亞砜加入乙腈中，攪拌2-10min,得到混合物B；

S2-3、將混合物A與混合物B混合，50-90℃下攪拌回流6-24h，反應結束后將所得產物加入乙醇中，7000-15000rpm下離心1-10min，離心所得固體45-70℃下真空干燥，得到經修飾N,N-二甲基乙二胺修飾后的熒光碳量子點，即所述染色化合物。

7.根據權利要求6所述的靶向溶酶體的細胞染色化合物的制備方法，其特征在于，所述步驟S2具體包括：

S2-1、將步驟S1制備的熒光碳量子點5mg加入5mL乙腈中，超聲3min，得到混合物A；

S2-2、將1.8mg鄰苯二胺和3mL氯化亞砜加入5mL乙腈中，攪拌5min,得到混合物B；

S2-3、將混合物A與混合物B混合，75℃下攪拌回流12h，反應結束后將所得產物加入乙醇中，10000rpm下離心3min，離心所得固體55℃下真空干燥，得到經修飾N,N-二甲基乙二胺修飾后的熒光碳量子點，即所述染色化合物。

8.一種如權利要求1-7中任意一項所述的方法制備的染色化合物在溶酶體靶向染色中的應用。