[發(fā)明專利]一種絲素蛋白顆粒的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211428093.9
• 申請(qǐng)日: 2022-11-15
• 公開（公告）號(hào): CN115636958A
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧曉然;劉虎;董新蕊;劉海豹;張小琴;章嘉麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 徐州醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C08J3/12
• 分類號(hào): C08J3/12;C08L29/04;C08L89/00
• 代理公司: 北京同輝知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11357
• 代理人: 張恩慧

本發(fā)明公開了一種絲素蛋白顆粒的制備方法，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過SP與PVA物理混合，二者之間發(fā)生相分散，制備出粒徑大小均一、粒徑尺寸可調(diào)的絲素蛋白顆粒。本發(fā)明提供的絲素蛋白球制備方法，極大地提高了產(chǎn)品粒徑的均一性，同時(shí)縮短制備周期，且制備過程中無有毒有機(jī)溶劑參與。因此，產(chǎn)品可作為化妝品輔料、醫(yī)療器械原料等廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、精細(xì)化工品行業(yè)，尤其作為藥物和生物制劑載體，在藥物遞送及疾病診療領(lǐng)域具有非常可觀的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種絲素蛋白顆粒的制備方法。

背景技術(shù)

近年來，為了優(yōu)化小分子藥物以及蛋白質(zhì)和生物酶等生物制劑的治療效果，許多以納米材料為基礎(chǔ)的藥物遞送系統(tǒng)得以開發(fā)并利用。這些藥物遞送系統(tǒng)不僅提高了藥物的生物利用度、減少毒副作用，還能實(shí)現(xiàn)藥物的靶向釋放和控制釋放。進(jìn)一步提高藥物遞送系統(tǒng)的生物安全性，降低其炎癥反應(yīng)和免疫原反應(yīng)，開發(fā)價(jià)格低廉、重復(fù)性高且易于生產(chǎn)、易于臨床轉(zhuǎn)化的納米載體具有重大意義。

然而，目前絲素蛋白(Silk Fibroin,SF)微納米材料的制備過程多涉及有機(jī)溶劑，如丙酮、環(huán)己烷等，會(huì)為絲基生物材料帶來不必要的生物毒性；此外，為保證絲基藥物遞送系統(tǒng)以及醫(yī)療器械和敷料在生物降解程度以及機(jī)械強(qiáng)度等的一致性和穩(wěn)定性，絲素蛋白微納米材料粒徑的均一性和可調(diào)節(jié)性顯得尤為重要。絲素蛋白微納米材料的形成與其絲素蛋白分子的親疏水性質(zhì)密切相關(guān)，而外界環(huán)境的變化會(huì)給絲素蛋白分子的親疏水性帶來巨大影響。因此，如何制備出粒徑均一且可調(diào)節(jié)的絲素蛋白微納米顆粒一直是個(gè)難點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提出了一種絲素蛋白顆粒的制備方法來制備產(chǎn)品具有高度均一的粒徑分布、大范圍的粒徑調(diào)節(jié)尺度、高生物安全性的絲素蛋白顆粒。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種絲素蛋白顆粒的制備方法，包括以下步驟：

將SF溶液與PVA溶液混合并進(jìn)行超聲處理，其中SF溶液與PVA溶液的質(zhì)量濃度比例為1:2至1:25；超聲結(jié)束后，將SF溶液與PVA溶液的混合溶液置于容器中，利用烘箱烘干水分，得到SF和PVA形成的薄膜；

將薄膜轉(zhuǎn)移至離心管中，加水溶解薄膜，通過離心分離獲得絲素蛋白顆粒沉淀，棄去上清，水洗沉淀3～5次，進(jìn)行冷凍干燥得到粒徑均一的絲素蛋白顆粒。SF分子在PVA溶液中，因SF與PVA分子間氫鍵和親疏水相互作用以及SF分子內(nèi)氫鍵作用強(qiáng)弱發(fā)生不同程度的自聚，形成粒徑均一可調(diào)的絲素蛋白顆粒。上述SF為絲素蛋白(Silk Fibroin)，PVA為聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol)。

在一些實(shí)施例中，SF溶液通過天然蠶繭進(jìn)行制備，制備方式為：將天然蠶繭除蛹后，進(jìn)行脫膠、溶解、透析處理，最終獲得SF溶液。

在一些實(shí)施例中，所述SF溶液與PVA溶液的體積比為1:4。

在一些實(shí)施例中，所述SF溶液的質(zhì)量濃度為0.1wt％～5wt％。

在一些實(shí)施例中，所述PVA溶液的質(zhì)量濃度為1.25wt％～10.0wt％。

在一些實(shí)施例中，所述超聲處理的條件為超聲能量為800瓦(W)、頻率為40千赫茲(kHz)、時(shí)間為30分鐘(min)。

在一些實(shí)施例中，所述離心分離的溫度為25攝氏度、轉(zhuǎn)速為11000轉(zhuǎn)/分鐘(rpm)、時(shí)間為20min。

在一些實(shí)施例中，所述烘箱的烘干溫度為37～60攝氏度(℃)、烘干時(shí)間為6小時(shí)(h)。

在一些實(shí)施例中，所述SF溶液的質(zhì)量濃度為0.05～0.1wt％，通過上述方式進(jìn)行制備可得到納米級(jí)絲素蛋白顆粒，粒徑范圍為320.59±14.81～360.55±3.65nm，其中最佳PDI＝0.04。