[發明專利]一種抗新型冠狀病毒的抗體及其在檢測中的應用

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• 申請號: 202211419347.0
• 申請日: 2022-11-14
• 公開（公告）號: CN115894673A
• 公開（公告）日: 2023-04-04
• 發明（設計）人: 羅海峰;奚建紅;鮑勇剛;王文峰;滕宏;周昊;陳超;萬歡
• 申請（專利權）人: 杭州華葵金配生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 郭蓮梅

本發明公開了一種抗新型冠狀病毒的抗體及其在檢測中的應用，涉及抗體技術領域。本發明提供的抗體所述抗體包括氨基酸序列依次如SEQ?IDNo.1～3所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3，和氨基酸序列依次如SEQ?IDNo.4～6所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，該抗體特異性、靈敏度高，能用于新冠病毒的檢測，基于所述抗體開發的新冠抗原檢測試劑，能夠在不受病毒突變株抗原蛋白突變的影響的情況下特異性檢測新型冠狀病毒，并且能夠降低檢測成本，縮短檢測時間，提高檢測效率。

技術領域

本發明涉及抗體技術領域，具體而言，涉及一種抗新型冠狀病毒的抗體及其在檢測中的應用。

背景技術

冠狀病毒是一個大型病毒家族，已知可引起感冒及中東呼吸綜合征(MERS)和嚴重急性呼吸綜合征(SARS)等較嚴重疾病。

新型冠狀病毒(2019-nCoV，SARS-CoV-2)是人類分離的第七類冠狀病毒。該病毒屬于β屬，有包膜，顆粒呈圓形或橢圓形，常為多形性，直徑60-140nm。其基因特征與SARS-CoV和MERS-CoV有明顯區別。SARS-CoV-2基本結構為基因組RNA和磷酸化核衣殼蛋白(N蛋白)組成的包膜結構。包膜結構嵌合4種蛋白：刺突糖蛋白(S蛋白)、小包膜糖蛋白(E蛋白)、膜糖蛋白(M蛋白)和血凝素糖蛋白(HE蛋白)。N蛋白被埋在磷脂雙層中被兩種不同類型的刺突蛋白覆蓋，負責營養物質運輸的膜蛋白(M蛋白，屬于Ⅲ型跨膜糖蛋白)和包膜蛋白(E蛋白)位于病毒包膜的S蛋白之間。

新型冠狀病毒變異毒株一般是指新型冠狀病毒在復制的過程中，個別病毒中的某個或某些基因序列可能出現輕微的改變，基因序列的改變讓病毒得以存活下來，并進行進一步的繁殖，一個新的新型冠狀病毒變異毒株也由此形成。一種新的新型冠狀病毒變異毒株的形成可能是在原有病毒毒株的基礎上增強或減弱,變異毒株的臨床表現、傳播方式、傳播速度等都有可能發生變化。新冠病毒屬于RNA病毒，比DNA病毒更容易發生突變。截至2021年9月26日，已有39個國家發現德爾塔變異毒株，45個國家發現阿爾法變異毒株，40個國家發現貝塔變異毒株。2021年末出現的新冠病毒奧密克戎突變株，突變位點數量明顯多于其它流行的所有新冠病毒變異株，尤其在病毒刺突(Spike)蛋白突變較多，導致這一病毒傳播力及免疫逃逸能力加強。這些不斷出現在世界各地的新冠病毒變異毒株，使得疫情防控及檢測難度不斷加劇，因此新冠疫情的防控是全世界國家與地區共同關心與面對的難題。

新型冠狀病毒的檢測方法主要包括如下。

a.病原學檢測：病毒的病原學檢測方法有細胞培養、血清學檢測、核酸檢測、電鏡檢測等。與其他方法相比較，核酸分子的檢測具有快速、靈敏度高、特異性強等特點，已成為冠狀病毒檢測的主流方法。現有的冠狀病毒核酸檢測方法包括全基因組測序、RT-PCR法、CRISPR、逆轉錄環介導等溫擴增法(RT-LAMP)和實時RT-LAMP等。針對SARS-CoV-2核酸的檢測，當前最為普遍適用的方法是實時熒光定量PCR法，即通過對標本中的病毒RNA進行提取、逆轉錄、PCR擴增特定保守序列后，通過熒光等常規方法進行顯示。此外，抗原檢測針對的是病原體自身的檢測，能夠在發病早期檢測出人體內是否含有病毒，從而提供病毒感染的直接證據。新冠病毒抗原檢測是通過抗原和抗體結合反應在試紙條上檢測患者口咽或鼻咽拭子中的病毒抗原，方便快捷，一般15-20分鐘即可出結果。新冠抗原檢測相對來說比較簡便、快速。

b.血清學檢查：血清學抗體檢測已被納入新冠肺炎確診標準之一。與核酸檢測相比，抗體檢測具有采樣簡單、檢測效率高等特點。IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體,是病毒感染自體免疫過程中最早出現的抗體，可作為近期急性感染的標志。在通常情況下，IgM抗體產生早，一經感染，快速產生，多在3～5天后開始出現陽性，維持時間短，消失快，血液中IgM檢測陽性可作為早期感染的指標。IgG抗體產生晚，維持時間長，消失慢，滴度恢復期較急性期有4倍及以上增高，血液中檢測陽性可作為感染和既往感染的指標。因此，通過檢測患者血清中IgM和IgG的陽性情況，將有助于判斷患者所處SARS-CoV-2感染的不同時期。