[發(fā)明專利]一種應(yīng)用于間接法免疫檢測的樣本稀釋液

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211405812.5
• 申請日: 2022-11-10
• 公開（公告）號: CN115754266A
• 公開（公告）日: 2023-03-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 于會理;馮濤
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州頤坤生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 北京精金石知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

本發(fā)明公開了一種應(yīng)用于間接法免疫檢測的樣本稀釋液，涉及免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的樣本稀釋液中包括兩性離子表面活性劑、血清和人IgG/IgM的結(jié)構(gòu)類似物。兩性離子表面活性劑的重量比為1?10g/kg，血清的重量比為100?500g/kg，免疫球蛋白的重量比為1?10mg/kg。通過添加特定量的兩性離子表面活性劑以及人IgG/IgM的結(jié)構(gòu)類似物，在整個反應(yīng)體系內(nèi)形成抑制加競爭結(jié)合的效果，降低樣本中IgG/IgM對固相載體的非特異性吸附，從而降低本底、減少假陽性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種應(yīng)用于間接法免疫檢測的樣本稀釋液。

背景技術(shù)

間接法免疫檢測是將特異性的重組或天然抗原偶聯(lián)至固相載體(常見的固相載體有磁微粒、96孔板等)，該抗原可以識別并結(jié)合人血清/血漿樣本中項目特異的IgG/IgM。此外，標記了示蹤物(如堿性磷酸酶、吖啶酯)的抗人抗體可與人IgG/IgM發(fā)生免疫反應(yīng)，與上述免疫反應(yīng)物結(jié)合形成免疫反應(yīng)復(fù)合物，加入底物后可產(chǎn)生光信號，信號值的高低即反映了樣本中待測物的濃度水平。間接法免疫檢測，主要應(yīng)用于傳染病抗體項目的檢測，如抗丙肝抗體、抗梅毒抗體等項目。

間接法的特點是，標記示蹤物的抗人抗體(抗人IgG/IgM)不能特異地識別某一疾病的抗體，而是識別所有人源的IgG/IgM。這就會導(dǎo)致樣本檢測時，由于在樣本中濃度極高而非特異性吸附到固相載體表面的人IgG/IgM也會產(chǎn)生信號值，造成的結(jié)果就是，本底升高，靈敏度降低，嚴重者會影響陰陽誤判，造成大量假陽性的結(jié)果。

為解決這一問題，常規(guī)的做法是將樣本進行預(yù)稀釋，以降低其中的IgG/IgM濃度，進而降低非特異性吸附。

常用的樣本稀釋液，成分為緩沖體系和蛋白，僅能發(fā)揮稀釋作用。

中國專利CN201611095552.0公開了一種檢測尿微量白蛋白的斑點金滲濾試劑盒及其應(yīng)用，包括：樣本稀釋液、洗滌液、膠體金標記人血清白蛋白抗體、尿微量白蛋白層析器和定標卡。其中所述樣本稀釋液包括防腐劑Triton-100、磷酸鹽緩沖溶液和Tris緩沖液溶劑。該發(fā)明的樣本稀釋液包括防腐劑和緩沖體系，不能對樣本中的非特異性吸附進行抑制。

中國專利CN202210416061.0公開了一種免疫層析檢測通用的樣本稀釋液及其制備方法，免疫層析檢測通用的樣本稀釋液包括以下質(zhì)量/體積比的組分：6％-12％酪蛋白，2％-20％表面活性劑，1％-20％防腐劑，5％-20％海藻糖，0.5％-1％氯化鈉，1％-10％阻斷劑，所述樣本稀釋液還包括0.04mol/L-0.06mol/L HEPES緩沖溶液。該發(fā)明的樣本稀釋液可通用于不同的檢測項目，具有通用性強、檢測靈敏度高的優(yōu)點，制備方法簡單方便，可用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。雖然酪蛋白在一定程度上可以競爭性地結(jié)合到固相載體表面，但是其與人IgG/IgM的結(jié)構(gòu)存在較大差異，競爭性弱。

因此，間接法免疫檢測過程中亟需一種樣本稀釋液，能夠明顯的減少或消除對固/液面非特異性吸附，進一步達到降本底、減少假陽性，提高靈敏度的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的提供一種用于間接法免疫檢測的樣本稀釋液。本發(fā)明的樣本稀釋液，在樣本稀釋的基礎(chǔ)上，通過添加特定量的兩性離子表面活性劑以及人IgG/IgM的結(jié)構(gòu)類似物，進一步降低樣本中IgG/IgM對固相載體的非特異性吸附，從而降低本底、減少假陽性。

為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明技術(shù)方案如下：

一方面，本發(fā)明提供了一種樣本稀釋液，所述的樣本稀釋液包括兩性離子表面活性劑、血清和人IgG/IgM的結(jié)構(gòu)類似物。

具體的，所述的兩性離子表面活性劑為甜菜堿或其類似物。

進一步具體的，所述甜菜堿或其類似物的成分包括強心甙和其他甾類成分。