[發明專利]一種咪唑-4-甲酸乙酯純度的HPLC檢測方法在審
| 申請號: | 202211399795.9 | 申請日: | 2022-11-09 |
| 公開(公告)號: | CN115656401A | 公開(公告)日: | 2023-01-31 |
| 發明(設計)人: | 梅青;柴金柱;胡中志;胡進;張佳;王世俊 | 申請(專利權)人: | 武漢海特生物創新醫藥研究有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/06 | 分類號: | G01N30/06;G01N30/30;G01N30/34;G01N30/60;G01N30/74 |
| 代理公司: | 武漢凌達知識產權事務所(特殊普通合伙) 42221 | 代理人: | 劉念濤 |
| 地址: | 430200 湖北省武漢市洪山區東湖新技術開發區高新大道*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 咪唑 甲酸 純度 hplc 檢測 方法 | ||
1.一種咪唑-4-甲酸乙酯純度的HPLC檢測方法,所述咪唑-4-甲酸乙酯分子式為C6H8N2O2,結構式為
,
其特征在于:采用反相高效液相色譜法,紫外檢測器,HPLC檢測條件如下
色譜柱:Agilent Poroshell 120 Bonus RP,100*4.6mm,2.7μm,親水性C18色譜柱,柱溫為30℃;
流動相:水相:20mM乙酸銨溶于0.05% H3PO4水溶液,有機相:乙腈;流速為1.0 ml/min;
洗脫程序:梯度洗脫;
檢測波長:210nm;
包括以下步驟:
(1)取咪唑-4-甲酸乙酯、已知雜質M02用50%乙腈水溶液作為稀釋劑溶解,定量稀釋制成每1ml稀釋劑含咪唑-4-甲酸乙酯 1.0mg、已知雜質M02 0.01mg的系統適用性溶液;
(2)取咪唑-4-甲酸乙酯用50%乙腈水溶液作為稀釋劑溶解,定量稀釋制成每1ml稀釋劑含1.0mg咪唑-4-甲酸乙酯的供試品溶液;
(3)取咪唑-4-甲酸乙酯用50%乙腈水溶液作為稀釋劑溶解,定量稀釋制成每1ml稀釋劑含0.0005mg咪唑-4-甲酸乙酯的定量限溶液;
(4)取5μl系統適用性溶液、供試品溶液、定量限溶液注入液相色譜儀,記錄色譜圖,完成咪唑-4-甲酸乙酯的純度的檢測。
2.根據權利要求1所述的一種咪唑-4-甲酸乙酯純度的HPLC檢測方法,其特征在于,所述的梯度洗脫為先用5%乙腈洗脫1 min,再將乙腈梯度升高至70%,時間11 min,再用70%乙腈沖洗3 min,最后用0.1min回調至起始比例5%乙腈,并平衡5 min。
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