[發明專利]一種MTV對映異構體的HPLC-UV檢測方法

在審

• 申請號: 202211399699.4
• 申請日: 2022-11-09
• 公開（公告）號: CN115656380A
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 梅青;胡進;鄔小惠;胡中志
• 申請（專利權）人: 武漢海特生物創新醫藥研究有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74
• 代理公司: 武漢凌達知識產權事務所(特殊普通合伙) 42221
• 代理人: 劉念濤

本發明公開了一種MTV對映異構體的HPLC?UV檢測方法，取MTV樣品用流動相稀釋劑溶解，同時取對映異構體用流動相稀釋劑溶解，配制成每1mL稀釋劑含MTV樣品2 mg，含對映異構體0.003mg的系統適用性溶液，取MTV樣品用稀釋劑溶解，配制成每1mL稀釋劑含MTV樣品2mg的樣品溶液，分別取上述溶液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，檢測MTV樣品對映異構體百分面積；本方法采用多糖衍生物正相涂敷型手性色譜柱，正己烷?異丙醇?三氟乙酸（90：10：0.1，v/v/v）色譜體系，等度洗脫，可以有效分離，檢測對映異構體百分面積，保證生產車間的順利生產。

技術領域

本發明屬于高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）方法，尤其是一種用HPLC檢測N-[N-甲基-N-[[(2-異丙基-4-噻唑基)甲基]氨基]羰基]-L-纈氨酸（MTV）對映異構體的方法。

背景技術

N-[N-甲基-N-[[(2-異丙基-4-噻唑基)甲基]氨基]羰基]-L-纈氨酸英文名稱為N-[N-methyl-N-[[(2-isopropyl-4-thiazolyl) methyl] amino] carbonyl]-L-valine，縮寫為MTV，結構式為，分子式為C₁₄H₂₃N₃O₃S，可作為有機合成中間體和醫藥中間體，用于實驗室研發過程和醫藥化工的合成，也是合成原料藥利托那韋的關鍵起始物料。在生產目標化合物利托那韋的過程中需要控制MTV對映異構體的含量。

MTV作為利托那韋的關鍵起始物料，其對映異構體的含量對原料藥利托那韋的對映異構體含量的質量控制起到關鍵作用，因此，對MTV的對映異構體含量進行質量控制，對利托那韋的生產過程中的質量控制有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測利托那韋關鍵起始原料MTV對映異構體含量的HPLC-UV方法。

本發明專利解決其技術問題所采用的技術方案是：一種MTV對映異構體的HPLC-UV檢測方法，檢測條件為：色譜柱：DAICEL CHIRALPAK AD-H，250mm*4.6mm，5μm，柱溫為30℃；流動相：正己烷：異丙醇：三氟乙酸=90：10：0.1（v/v/v）的混合溶液；流速為0.8 mL/min；洗脫程序：梯度洗脫等度洗脫，運行時間為30min；檢測波長：240nm為最大吸收波長，用于對對映異構體進行定量檢測；包括以下步驟

（1），取結構式為的MTV樣品，用流動相混合溶液作為稀釋劑溶解，配制成每1mL稀釋劑含MTV樣品2 mg的樣品溶液；

（2），分別取MTV樣品和MTV對映異構體用流動相混合溶液作為稀釋劑溶解，配制成每1mL稀釋劑含MTV樣品2 mg和異構體0.003mg的系統適用性溶液；

（3），分別取步驟（1）、（2）的溶液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，檢測N-[N-甲基-N-[[(2-異丙基-4-噻唑基)甲基]氨基]羰基]-L-纈氨酸對映異構體百分面積。

進一步，液相色譜儀為Thermo Ultimate 3000/VC，DAD檢測器。

本發明的有益效果是：本發明選擇流動相正己烷-異丙醇-三氟乙酸（90：10：0.1，v/v/v）溶解MTV樣品，避免溶劑效應，且降低了稀釋劑與流動相不匹配，MTV樣品在體系中析出的可能，并且樣品溶液有一定的穩定性；本發明選擇DAICEL CHIRALPAK AD-H（250mm*4.6mm，5μm），常規色譜柱，柱溫30℃，適用于所有HPLC儀器，在正己烷-異丙醇-三氟乙酸（90：10：0.1，v/v/v）體系下，MTV樣品與其對映異構體完全基線分離，且與MTV樣品中其他已知雜質不干擾對映異構體的檢測，專屬性好，選擇性高；本發明方法能簡單、快速的測定MTV樣品的純度、有關物質含量、殘留溶劑大小，解決了MTV樣品在生產過程中反應監控的問題。

附圖說明