[發明專利]血栓彈力圖凝血激活檢測試劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202211399664.0
• 申請日: 2022-11-09
• 公開（公告）號: CN115656525A
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 黃夢璐;梁偉國;趙穎;孫海旋;王弼陡;李富陽;楊語諶;陳明
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所
• 主分類號: G01N33/86
• 分類號: G01N33/86
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 黃雁君

本發明公開了一種血栓彈力圖凝血激活檢測試劑及其制備方法，該試劑包括以下組分：緩沖液、鹽離子化合物、高嶺土、磷脂、組織因子酯化物、抗氧化劑、水解明膠、凍干保護劑以及防腐劑，所述水解明膠的質量濃度為0.1％?10％。本發明提供的血栓彈力圖凝血激活檢測試劑，在常用凍干保護劑基礎上添加水解明膠，使得凍干后試劑不但穩定性好，抗潮能力也大大增加，無需對測試杯進行壓膜密封處理，可以直接將試劑凍干于測試杯中，與現有同類產品以及技術相比，無需對試劑進行復溶、轉移，取出即可用，不但簡化了生產工藝，同時也簡化了操作流程，減少測試前過多操作帶來的誤差，更適用于全自動血栓彈力圖儀。

技術領域

本發明涉及凝血檢測領域，特別涉及一種血栓彈力圖凝血激活檢測試劑及其制備方法。

背景技術

TEG是一種全血粘彈性檢測技術，粘彈性檢測的本質是對阻力或摩擦力的記錄，通過在模擬人體體內環境中全血標本的血液粘彈性變化來反映血液凝固的動態變化，用物理學原理監測從凝血因子激活到形成血小板-纖維蛋白、血小板聚集、形成穩定的血凝塊再到纖維蛋白溶解的過程，以此來反映血凝塊形成的速率、強度及穩定性(纖溶水平)，這是對凝血與纖溶的全過程進行功能性評估。TEG可以實時連續反映除血管因素外所有血液成分參與的整個的凝血過程，以此判斷患者出血及血栓的風險。TEG能更敏感更全面評估凝血的異常狀態，預測患者出血與死亡的風險，有利于臨床醫生清晰明確的制定輸血策略、指導合理用藥及抗血栓等臨床治療，可有效控制患者的死亡率。

快速TEG檢測項目所使用的檢測試劑為凝血激活檢測試劑，包含高嶺土、組織因子，同時激活內源性和外源性凝血途徑，與普通TEG檢測項目相比，檢測時間更短，可在10min左右對患者凝血功能全貌進行評估。快速TEG適用于急診創傷后凝血功能異常的診斷和實時檢測。快速TEG的主要檢測參數包括：TEG ACT、R、K、Angle、MA等。激活全血凝固時間(ACT)能夠快速預測輸血的需求，其延長提示凝血因子缺乏或血液稀釋；凝血反應時間(R)指檢測開始到描記幅度達到2mm的時間，用于評估凝血啟動過程中凝血因子的綜合作用；血液凝血時間(K)和凝固角(Angle)反映血凝塊形成的速度，主要與纖維蛋白原水平和功能相關；最大振幅(MA)為血凝塊的最大強度時的振幅，主要反映由凝血酶激活的血小板和纖維蛋白原在止血中的作用。

市場上現有的血栓彈力圖儀以半自動為主，存在自動化能力弱，檢測通道較少，人工操作誤差等不足，因此全自動設備的需求和應用也越來也多。市面上現有血栓彈力圖儀配套凝血激活檢測試劑，不管是半自動還是全自動，均需要對凝血激活檢測試劑進行復溶，然后吸取檢測試劑到測試杯中，才能進行下一步操作，操作過程繁瑣。如CN108982865A描述凍干試劑在半自動血栓彈力圖中的檢測過程：從2-8℃環境中取出試劑，室溫平衡一段時間后加20ul水復溶，再吸取10ul復溶試劑加入測試杯，之后再加入氯化鈣溶液和檢測樣本。CN108761104A公開了一種液體凝血激活劑的操作流程：將冷藏試劑常溫放置，恢復至室溫。裝載測試杯，移取氯化鈣溶液和凝血激活劑，再加入檢測樣本。CN207516385公開了一種快速血栓彈力圖儀檢測試劑盒：將試劑盒分為血樣試劑瓶和助劑試劑瓶。抽取1mL血樣，依次與裝有組織因子的助劑試劑瓶、裝有磷脂的助劑試劑瓶和裝有高嶺土的助劑試劑瓶內試劑混合，轉移入血樣試劑瓶存放，然后配合血栓彈力圖進行上機檢測。目前，市售主要產品如樂普醫療及Haemonetics等凝血激活檢測試劑盒均為西林瓶裝樣凍干粉，為保證檢測試劑的密封性，凍干結束后進行真空壓塞，并加蓋鋁塑蓋，若密封不當，可能會試劑盒失活。同時測試前需加入純化水復溶，上下顛倒混勻后再轉移至測試杯中用于檢測。此過程中復溶不充分，轉移操作過程產生的誤差均影響檢測結果準確性。大多數全自動設備配套凝血激活檢測試劑盒與半自動設備一致，仍采用西林瓶裝樣試劑，操作步驟復雜。深圳沃德生命科技有限公司研制出一種單人份試劑卡，但為了保證試劑密封性，需要對試劑卡進行鋁封操作，同時還需要對檢測試劑進行復溶、轉移。

發明內容