[發明專利]一種膠體金免疫層析速測卡檢測荔枝農藥殘留的前處理方法

在審

• 申請號: 202211365764.1
• 申請日: 2022-10-31
• 公開（公告）號: CN115656504A
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 潘喜芳;韋齡乾;黃全書;蔣揚柏;施顯超;李麗燕;盧希源;鐘昌宇;鐘英海;韋思肖;鐘文明
• 申請（專利權）人: 欽州市農產品質量安全檢測中心
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/543;G01N33/53
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 唐智芳

本發明公開了一種膠體金免疫層析速測卡檢測荔枝農藥殘留的前處理方法，具體為：取荔枝樣品，加入乙腈后破碎、勻漿，然后加入氯化鈉，過濾，濾液經振蕩、靜置后收集上清液，吸取一定量上清液氮吹至近干，即為待測樣品。本發明通過在荔枝樣品中加入乙腈即可去除基質效應，使荔枝樣品在進行簡單的前處理后采用膠體金免疫層析法進行檢測即可避免因荔枝糖分過高導致速測卡出現測定無效的情況，且速測卡的檢測結果與常規液質聯用的測定結果吻合，非常適用于現場快速檢測。

技術領域

本發明涉及果蔬中農藥殘留的檢測方法，具體涉及一種膠體金免疫層析速測卡檢測荔枝農藥殘留的前處理方法。

背景技術

目前，我國新鮮果蔬中農藥殘留檢測的定性檢測方法主要有酶抑制法和紙片法，檢測技術標準為GB/T 5009.199-2003。但是，這兩種速測法只能進行有機磷類和氨基甲酸酯類農藥殘留的檢測，不能滿足《食品安全國家標準食品中農藥殘留最大殘留量》(GB2763-2021)中規定的其他類型農藥殘留的測定，如荔枝中需要檢測的毒死蜱、吡唑醚菌酯、啶蟲脒(也稱啶蟲咪)、甲霜靈、氟蟲腈、吡蟲啉、阿維菌素、多菌靈、苯醚甲環唑等9種農藥殘留，上述兩種速測法均不能給出有效的檢測結果。

膠體金檢測，是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術，在生物、醫學各領域得到了日益廣泛的應用。將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標記試劑(抗體或單克隆抗體)吸附在結合墊上，當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后，通過毛細作用向前移動，溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應，再移動至固定的抗原或抗體的區域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，可通過肉眼觀察到顯色結果。這種方法現已發展成為試紙條，使用十分方便。

膠體金免疫層析速測卡(也稱膠體金免疫層析試劑卡或膠體金免疫層析試紙條)是按照GB 2763-2021或國際農藥殘留限量標準設定cutoff值，能半定量檢測出最大限量標準值的快速檢測果蔬中農藥殘留的試紙條，其檢測結果與傳統的核心或中心實驗室的檢測結果一致或相似。采用膠體金免疫層析速測卡對果蔬中農藥殘留進行檢測時，都需要對果蔬進行前處理。對于水果而言，其前處理方法通常是將水果樣品破碎或搗碎后勻漿(也可以在勻漿后加入少量氯化鈉除水)即可。本申請人在實踐工作中發現，采用這種常規的前處理方法對荔枝進行前處理，在后續膠體金對荔枝農殘的檢測時常常顯示無效(對照線C線未出現)，申請人經過分析認為，可能是荔枝中糖分含量過高，干擾速測卡中提取液成分從而影響結果測定，導致速測卡測定無效。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種膠體金免疫層析速測卡檢測荔枝農藥殘留的前處理方法，該方法簡單易操作，可避免速測卡出現測定無效的情況，且速測卡的檢測結果與常規液質聯用的測定結果一致。

為解決上述技術問題，本發明采用以下技術方案：

一種膠體金免疫層析速測卡檢測荔枝農藥殘留的前處理方法，其特征是，取荔枝樣品，加入乙腈后破碎、勻漿，然后加入氯化鈉，過濾，濾液經振蕩、靜置后收集上清液，吸取一定量上清液氮吹至近干，即為待測樣品。

本發明所述前處理方法中，乙腈的加入量優選按1g荔枝樣品加入2～3mL乙腈的基準計算，更優選是按1g荔枝樣品加入2mL乙腈的基準計算。

本發明所述前處理方法中，氯化鈉的加入量為現有技術中的常規加入量，具體可以是按1g荔枝樣品加入0.2～0.3g氯化鈉的基準計算，進一步優選按1g荔枝樣品加入0.25g氯化鈉的基準計算。

本發明所述前處理方法中，在吸取上清液氮吹至近干時，按10g荔枝樣品吸取1～1.1mL上清液進行氮吹至近干的基準計算，更優選是按10g荔枝樣品吸取1mL上清液的基準計算。

本發明中所述的荔枝樣品是指采摘的新鮮荔枝在去除枝柄和果核后的剩余物。

在完成前處理得到待測樣品后，根據膠體金免疫層析速測卡的說明書對待測樣品進行操作以完成對荔枝中農殘的檢測。