[發明專利]一種戴爾福特菌D39和俊片菌M1031的土壤修復復合菌劑及制備方法

有效

• 申請號: 202211364995.0
• 申請日: 2022-11-03
• 公開（公告）號: CN115404191B
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發明（設計）人: 趙曉燕;周方園;吳曉青;范素素;張廣志;謝雪迎;張新建
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生態研究所（山東省科學院中日友好生物技術研究中心）
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 尹儷娟

1.一種戴爾福特菌D39和俊片菌M1031的土壤修復復合菌劑，其特征在于，原料包括20~30重量份的戴爾福特菌（Delftia sp.）D39發酵液、5~10重量份的俊片菌（Lampropedia sp.）M1031發酵液、8~10重量份的潤濕劑、60~70重量份的分散劑和1~5重量份的紫外保護劑；

所述戴爾福特菌D39由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.16844，保藏日期為2018年11月30日；

所述俊片菌M1031由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.20988，保藏日期為2020年11月2日。

2.如權利要求1所述的土壤修復復合菌劑，其特征在于，所述潤濕劑包括木質磺酸鈣和萘磺酸鹽縮聚物。

3.如權利要求2所述的土壤修復復合菌劑，其特征在于，所述木質磺酸鈣與萘磺酸鹽縮聚物的質量比為3:2。

4.如權利要求1所述的土壤修復復合菌劑，其特征在于，所述分散劑為硅藻土，所述紫外保護劑為羧甲基纖維素。

5.如權利要求1所述的土壤修復復合菌劑，其特征在于，所述土壤修復復合菌劑在土壤中的接種量為2~10g?kg^-1。

6.一種如權利要求1所述土壤修復復合菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將戴爾福特菌D39發酵液、俊片菌M1031發酵液、潤濕劑、分散劑、紫外保護劑混合，攪拌均勻；

（2）將混合后的原料放入氣流粉碎機粉碎，粉碎后過篩，制得土壤修復復合菌劑。

7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述戴爾福特菌D39發酵液采用以下方法制成：

S1、取保藏的戴爾福特菌D39菌株劃線于LB固體培養基上，25~30℃倒置活化培養1~2d，制得活化后的菌株；

S2、向500mL三角瓶中裝入100~150mL的LB液體培養基，LB液體培養基pH為7.0~7.5，取活化后的菌株接種于LB液體培養基中，接種量為4%~8%，于30~32℃搖床振蕩培養2~3d，制得菌液；

S3、向盛有發酵培養基A的500L發酵罐中，接種菌液，初始接種量4%，轉速350r?min^-1，溶氧5mmol?L^-1，流加氨水控制pH=7.0，溫度32℃，發酵40~52h，制得戴爾福特菌D39發酵液；

所述發酵培養基A以質量份數計，包括玉米粉2份，豆粉2份，葡萄糖1份，硫酸銨0.1份，磷酸氫二鉀0.2份，磷酸二氫鉀0.2份，七水硫酸鎂0.03份，去離子水補足至100份。