[發明專利]A類大豆皂苷乙酰基轉移酶GmSSAcT1的制備方法及所用微生物

在審

• 申請號: 202211343011.0
• 申請日: 2022-10-31
• 公開（公告）號: CN115838701A
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 王國棟;苑佳
• 申請（專利權）人: 中國科學院遺傳與發育生物學研究所
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N15/70;C12N15/54;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.制備乙酰基轉移酶的方法，包括：將乙酰基轉移酶基因表達載體導入微生物中，得到產乙酰基轉移酶的重組微生物；所述乙酰基轉移酶基因表達載體為在出發表達載體中插入乙酰基轉移酶基因得到的表達乙酰基轉移酶的重組載體；

所述乙酰基轉移酶是如下任一種的蛋白質：

A1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白質；

A2)將A1)的蛋白質經過氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與A1)所示的蛋白質具有80％以上的同一性且具有催化大豆皂苷Aa或Ab功能的蛋白質；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端連接蛋白質標簽得到的融合蛋白質，

所述基因編碼所述蛋白，所述基因選自下述任一種：

B1)編碼鏈的編碼序列是SEQ ID No.2的cDNA分子或DNA分子；

B2)與B1)限定的DNA分子具有80％以上的同一性且編碼所述大豆皂苷A乙酰基轉移酶的DNA分子。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述乙酰基轉移酶蛋白來源于大豆。

3.應用，其特征在于：所述應用為下述任一種：

U1)權利要求1所述的蛋白質在作為大豆皂苷A乙酰基轉移酶中的應用；

U2)權利要求1所述的蛋白質、或調控所述蛋白質基因表達的物質或調控所述蛋白活性或含量的物質在制備大豆皂苷A乙酰基轉移酶中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述調控所述蛋白質基因表達的物質和所述調控所述蛋白活性或含量的物質為與所述蛋白質相關的生物材料，所述生物材料為下述B1)至B7)中的任一種：

B1)編碼權利要求1中所述蛋白質的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表達盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重組載體、或含有B2)所述表達盒的重組載體；

B4)含有B1)所述核酸分子的重組微生物、或含有B2)所述表達盒的重組微生物、或含有B3)所述重組載體的重組微生物；

B5)含有B1)所述核酸分子的轉基因植物細胞系、或含有B2)所述表達盒的轉基因植物細胞系；

B6)含有B1)所述核酸分子的轉基因植物組織、或含有B2)所述表達盒的轉基因植物組織；

B7)含有B1)所述核酸分子的轉基因植物器官、或含有B2)所述表達盒的轉基因植物器官。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：B1)所述核酸分子為編碼鏈的編碼序列是SEQ ID No.2的cDNA分子或DNA分子。

6.一種重組大腸桿菌，其特征在于：所述重組大腸桿菌含有權利要求1所述的蛋白的編碼基因。

7.如權利要求6所述的重組大腸桿菌，其特征在于：所述重組大腸桿菌表達所述大豆皂苷A乙酰基轉移酶。

8.如權利要求6或7所述的重組大腸桿菌，其特征在于：所述大豆皂苷A乙酰基轉移酶選自下述任一種蛋白質：

1)氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的蛋白質；

2)將1)所示的蛋白質經過氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的與1)所示的蛋白質具有80％以上的同一性且具有催化大豆皂苷Aa或Ab功能的蛋白質；

3)在1)或2)的N末端或/和C末端連接蛋白標簽得到的融合蛋白質。

9.如權利要求6至8中任一所述的重組大腸桿菌，其特征在于：所述重組大腸桿菌的構建方法包括將所述大豆皂苷A乙酰基轉移酶基因導入受體菌中得到所述重組大腸桿菌。