[發明專利]冷凍保存NK細胞的方法

有效

• 申請號: 202211318311.3
• 申請日: 2022-10-26
• 公開（公告）號: CN115644166B
• 公開（公告）日: 2023-06-09
• 發明（設計）人: 牟春琳;秦臻;李政楠;張雅楠;武嘉釗;王秀娥
• 申請（專利權）人: 華域生命科技（天津）有限公司;華域生物科技（天津）有限公司;天津華域藥業有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京繪聚高科知識產權代理事務所(普通合伙) 11832
• 代理人: 羅碩

1.冷凍保存NK細胞的方法，包括：

a)?將NK細胞用包含血清淀粉樣蛋白A的培養基預處理；所述血清淀粉樣蛋白A的添加量為0.1μg/mL~1μg/mL；所述培養基包含基礎培養基、3v/v%~10?v/v?%的血清、IL2和IL18；所述IL2的添加量為500U/mL~1000U/mL，所述IL18的添加量為200?U/mL~600U/mL；

b)?將預處理后的NK細胞與細胞凍存液混合得到混合物，并降低所述混合物的溫度至冷凍保存溫度；

所述細胞凍存液包含60?v/v%~80?v/v%?的羥乙基淀粉、7?v/v%~13?v/v%的DMSO、5v/v%~15v/v%的蔗糖和5v/v%~15v/v%的白蛋白。

2.根據權利要求1所述的冷凍保存NK細胞的方法，所述基礎培養基選自X?VIVO-15、RPMI1640、AIM-V、α-MEM培養基。

3.根據權利要求1所述的冷凍保存NK細胞的方法，所述血清為自體血清。

4.根據權利要求1所述的冷凍保存NK細胞的方法，所述細胞凍存液還包含維持所述細胞凍存液為中性的緩沖劑。

5.根據權利要求1所述的冷凍保存NK細胞的方法，所述NK細胞在所述混合物的含量為1×10^(6~8)個/mL。

6.根據權利要求1所述的冷凍保存NK細胞的方法，凍存的溫度為-80℃~-196℃。