[發明專利]一種用于培養貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1的液體發酵培養基及方法

在審

• 申請號: 202211313284.0
• 申請日: 2022-10-25
• 公開（公告）號: CN115478037A
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發明（設計）人: 魯耀雄;高鵬;謝進;崔新衛;謝坤英
• 申請（專利權）人: 湖南省農業環境生態研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 深圳峰誠志合知識產權代理有限公司 44525
• 代理人: 張騰

1.一種用于培養貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1的液體發酵培養基，其特征在于，所述液體發酵培養基包括以下物質：

復合氨基酸7.5-15g/L

酵母粉6-12g/L

NaCl 0.75-1.5g/L

MgSO₄·7H₂O 0.75-1.5g/L

去離子水1L。

2.根據權利要求1所述的一種用于培養貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1的液體發酵培養基，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1在中國典型培養物保藏中心的保藏編號為CCTCC M20221140，保藏機構地址：湖北省武漢市武昌區八一路299號。

3.根據權利要求1所述的一種用于培養貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1的液體發酵培養基，其特征在于，所述復合氨基酸以重量份數計，由以下成分組成：甘氨酸5-25份、亮氨酸5-25份、胱氨酸5-25份、色氨酸5-25份、甲硫氨酸1-20份、絲氨酸1-20份、酪氨酸1-20份、脯氨酸0-20份、谷氨酸0-20份、天門冬氨酸0-20份。

4.根據權利要求3所述的一種用于培養貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1的液體發酵培養基，其特征在于，所述復合氨基酸以重量份數計，由以下成分組成：甘氨酸15份、亮氨酸15份、胱氨酸15份、色氨酸15份、甲硫氨酸10份、絲氨酸10份、酪氨酸5份、脯氨酸5份、谷氨酸5份、天門冬氨酸5份。

5.一種利用權利要求1所述液體發酵培養基培養貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)菌種的活化：將貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1進行解凍，接著用接種環挑取后劃線在NA固體培養基平皿上進行培養，培養后挑選生長旺盛的單菌落連續劃線2～3次，活化好貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1。

(2)種子發酵液的制備：用接種鏟取步驟(1)中所得活化好的貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1，轉接到裝有滅菌冷卻好的NB液體培養基三角瓶中，置于恒溫振蕩培養箱培養，制成種子發酵液。

(3)液體發酵培養：取步驟(2)中所得種子發酵液轉接到裝有滅菌冷卻好的所述液體發酵培養基三角瓶中，置于恒溫振蕩培養箱中進行發酵培養，得到高濃度貝萊斯芽孢桿菌YFB3-1。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述NA固體培養基的成分為：蛋白胨7.5-15g，牛肉膏2-5g，NaCl 3-6g，瓊脂18-22g，去離子水1000mL；所述NA固體培養基培養溫度為25-45℃，培養時間為36-72h。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述NB液體培養基的成分為：蛋白胨7.5-15g，牛肉膏2-5g，NaCl 3-6g，去離子水1000mL；步驟(2)中所述恒溫振蕩培養箱培養溫度為25-45℃，培養時間為36-72h，轉速為150-210r/min。

8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(3)中所述種子發酵液接種量為2.5％-2.8％，所述液體發酵培養基初始pH為5.0-9.0，所述恒溫振蕩培養箱培養溫度為25-45℃，培養時間為36-72h，轉速為150-210r/min。