[發(fā)明專利]枯草芽胞桿菌GB519可濕性粉劑、水劑及其制備方法與應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202211310685.0 | 申請(qǐng)日： | 2022-10-25 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN115581228A | 公開（公告）日： | 2023-01-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 朱峰 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號(hào)： | A01N25/04 | 分類號(hào)： | A01N25/04;A01N25/14;A01N63/22;A01P3/00 |
| 代理公司： | 成都科海專利事務(wù)有限責(zé)任公司 51202 | 代理人： | 劉寧 |
| 地址： | 130000 吉林省長*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 枯草 桿菌 gb519 可濕性粉劑 水劑 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種枯草芽胞桿菌GB519可濕性粉劑的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：
(1)發(fā)酵液的制備
S1：種子發(fā)酵：用接種環(huán)將斜面接種后培養(yǎng)好的枯草芽胞桿菌GB519，接種到LB液體培養(yǎng)基中，進(jìn)行活化培養(yǎng)，得到種子發(fā)酵液，備用；
S2：一級(jí)發(fā)酵罐發(fā)酵：將一級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)基滅菌后冷卻至28℃～30℃，在所述一級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)基中按體積5％～10％的接種量接種步驟S1得到的所述種子發(fā)酵液，進(jìn)行一級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)，得到一級(jí)培養(yǎng)液；
S3：發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)：將擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基滅菌后冷卻至28℃～30℃，在所述擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基中按體積5％～20％的接種量接種步驟S2得到的所述一級(jí)培養(yǎng)液，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到擴(kuò)大培養(yǎng)液，備用；
(2)芽胞提取與回收工藝
將步驟(1)得到的所述擴(kuò)大培養(yǎng)液進(jìn)行離心，得到上清液和濃縮液；將所述上清液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后，重新加入到濃縮液中，再將混合后的濃縮液經(jīng)噴霧干燥，得到枯草芽胞桿菌GB519原粉；
(3)枯草芽胞桿菌GB519可濕性粉劑的制備
枯草芽胞桿菌GB519可濕性粉劑由包括如下重量份的原料制備：步驟(2)得到的所述枯草芽胞桿菌GB519原粉40～80份，載體5～50份，潤濕劑5～20份，分散劑5～20份，紫外保護(hù)劑0.5～5份和干燥保護(hù)劑0.5～5份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S1中，所述活化培養(yǎng)具體為：在30℃、150rpm條件下，在250mL的LB液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)12～16h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S2中，所述一級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為30℃，轉(zhuǎn)速為300rpm，通氣量為1:1.5，發(fā)酵周期為16h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S2中，一級(jí)發(fā)酵罐培養(yǎng)基包括以下重量百分比的原料：可溶性淀粉1％、大豆蛋白胨1％、糖蜜1％、NaCl 0.5％和MgSO40.5％，調(diào)整pH為6.8～7.2；所述滅菌具體為在121℃下滅菌30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟S3中，所述擴(kuò)大培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基包括以下重量百分比的原料：大豆粉1％、玉米漿1％、可溶性淀粉1％、大豆蛋白胨1％、糖蜜3％、NaCl 1％、MgSO41％和亮氨酸1％，調(diào)整pH為6.8～7.2；121℃滅菌30min；冷卻至30℃時(shí)，進(jìn)行接種；步驟S3中，所述擴(kuò)大培養(yǎng)的發(fā)酵溫度為30℃，轉(zhuǎn)速為300rpm，通氣量為1:1.5，發(fā)酵周期為48h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述枯草芽胞桿菌GB519原粉的活芽胞含量大于5000億芽胞/g；步驟(3)中，所述枯草芽胞桿菌GB519可濕性粉劑的芽胞含量大于1000億芽胞/克。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述載體選自輕質(zhì)碳酸鈣、白炭黑、高嶺土、滑石粉、硅藻土、膨潤土中的一種或多種；所述潤濕劑選自十二烷基苯磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、脂肪醇聚氧乙烯醚、拉開粉BX、凈洗劑LS、DCM-82、GreenWet BP中的一種或多種；所述分散劑選自羧甲基纖維素鈉、木質(zhì)素磺酸鈉、擴(kuò)散劑MF、三聚磷酸鈉、烷基酚聚氧乙烯醚磷酸酯、聚乙二醇中的一種或多種；所述紫外保護(hù)劑選自黃腐殖酸、糊精、抗壞血酸、羧甲基纖維素、黃原膠中的一種或多種；所述干燥保護(hù)劑選自蔗糖、麥芽糖、谷氨酸鈉、甘露糖中的一種或多種；優(yōu)選的，所述枯草芽胞桿菌GB519原粉中還包括芽胞萌發(fā)劑，所述芽胞萌發(fā)劑選自葡萄糖、丙氨酸、肌苷中的一種或多種。
8.一種根據(jù)權(quán)利要求1-7所述的制備方法得到的枯草芽胞桿菌GB519可濕性粉劑。
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