[發明專利]一種抑制肝細胞凋亡的表面分子及其應用

在審

• 申請號: 202211307543.9
• 申請日: 2022-10-25
• 公開（公告）號: CN116217704A
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 蘇川;周莎;雷志剛;陳曉軍
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: C07K14/74
• 分類號: C07K14/74;C12N15/12;A61K45/00;A61K48/00;A61K38/17;A61K39/395;A61P1/16
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 競存;徐冬濤

本發明公開了一種抑制肝細胞凋亡的表面分子及其應用。本發明通過實驗首次證明肝細胞CD1d(cluster?of?differentiation?1d)具有高效抗凋亡的肝保護作用，并在技術上通過腺相關病毒特異性高表達小鼠肝細胞CD1d，或通過小鼠尾靜脈注射激動型單克隆抗體活化CD1d，在非酒精性脂肪性肝炎模型以及凋亡性急性肝損模型中均顯示了較好的肝細胞抗凋亡的肝保護作用。本發明可預先或主動特異性增強肝細胞的抗凋亡和抗損傷能力，不僅可應用于急慢性肝病的治療，還可用于肝損傷的預防，且作用機制特異故而理論上毒副作用也可能較小。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體涉及一種肝細胞表面分子CD1d(cluster?ofdifferentiation?1d)在高表達或通過抗體激活后可有效抑制肝細胞凋亡，可作為急慢性肝病中預防和/或治療肝損傷藥物中的應用。

背景技術

全球超過10億人、中國超過3億人罹患肝病，嚴重危害人類健康。肝細胞是肝臟中最主要的細胞群，是各種急慢性肝病中的主要損害靶標。肝細胞凋亡是由多個基因共同調控的一種程序性細胞死亡。正常生理情況下，肝細胞可通過凋亡這種“自我破壞”的方式去除衰老或損壞的肝細胞，從而有利于維持肝臟穩態。但另一方面，多種損傷因素也會誘導肝細胞發生過度凋亡，從而介導了多種急慢性肝病的發生、發展，例如中毒、病毒性肝炎、脂肪性肝炎、酒精性肝炎、藥物性肝炎、自身免疫、膽汁淤積性肝炎、缺血再灌注性損傷等。但目前臨床上仍缺乏有效的改善肝細胞抗凋亡能力從而控制肝臟損傷的干預手段。

CD1d(分化抗原簇1d，cluster?of?differentiation?1d)，與MHC-I類分子高度同源，屬非經典MHC-I類似分子(non-classical?MHC?class?I-like?molecule)，表達于多種細胞表面。表達于抗原遞呈細胞的CD1d可通過遞呈脂類抗原激活NKT細胞而促進組織炎癥。CD1d也組成性表達于一些組織細胞，如肝細胞、腸上皮細胞等，近年的研究提示組織細胞CD1d主要參與維持局部微環境的穩定。

目前進入臨床實驗的抗肝細胞凋亡藥物主要是針對肝損傷發生時激活或執行凋亡的關鍵酶(如Caspase家族分子)的化學抑制劑(如emricasan、VX-166等)，即肝損害已顯著發生時才會出現的病理性靶標，因此僅適用于治療；目前臨床研究提示，此類治療效果欠佳且維持時間短，且化學藥物的毒副作用可能使部分患者甚至出現進一步肝損，導致病情加重。而本發明通過如下技術方案可預先或主動特異性增強肝細胞抗凋亡能力，因此不僅適用于治療，還對肝損傷有一定的預防價值，且作用機制特異故而理論上毒副作用也可能較小。

發明內容

本發明針對目前臨床上缺乏特異性提高肝細胞抗凋亡能力的手段，提供了一種可方便、有效地提高肝細胞抗凋亡和抗損傷能力的細胞表面干預靶標，今后可通過病毒載體靶向提高肝細胞CD1d表達水平或用單克隆抗體或小分子藥物特異性激活肝細胞表面CD1d，從而應用于臨床上急慢性肝病中肝損傷的預防和治療。

本發明技術方案如下：

本發明的第一個目的是提供一種抑制肝細胞凋亡的表面分子，所述表面分子為肝細胞CD1d蛋白分子。

進一步的，人CD1d蛋白分子全長氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，小鼠CD1d蛋白分子全長氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。

在某個特殊的實施例中，編碼CD1d蛋白的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示。

本發明的第二個目的是提供前述的表面分子作為干預靶標在制備、開發或篩選藥物或試劑中的應用，所述藥物或試劑的功能包括如下至少一種：

(1)預防和/或抑制肝細胞凋亡；

(2)預防和/或抑制肝細胞損傷；

(3)預防和/或抑制肝細胞凋亡執行分子Caspases的激活；

(4)增加肝細胞抗凋亡蛋白分子的表達。