[發明專利]一種水產品中4種硝基呋喃類代謝物的檢測方法

在審

• 申請號: 202211300452.2
• 申請日: 2022-10-24
• 公開（公告）號: CN116046918A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 李晉成;封騰望;周銳東;劉歡;孫慧武
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 任曉云

本發明公開了一種水產品中4種硝基呋喃類代謝物的檢測方法，屬于藥物殘留的理化檢測技術領域。本發明提供的檢測方法，包括如下步驟：(1)采用2?吡咯甲醛溶液作為衍生試劑對水產品樣品中4種硝基呋喃類代謝物進行衍生反應，然后采用有機溶劑進行提取，得到待凈化樣品；(2)對步驟(1)所得待凈化樣品進行凈化，凈化后采用液相色譜串聯質譜儀對其進行檢測。本發明的方法采用2?吡咯甲醛進行衍生反應，乙酸乙酯提取，推桿式濾過型凈化柱凈化，凈化后用UPLC?MS/MS分析測定水產品中的藥物殘留量，該方法干擾較少，前處理簡便、快捷，回收率、精密度和靈敏度指標均符合藥物殘留分析要求。

技術領域

本發明涉及藥物殘留的理化檢測技術領域，具體涉及的是一種水產品中4種硝基呋喃類代謝物的檢測方法。

背景技術

我國是漁業大國，水產品的總產量多年來居世界首位，極大滿足了人們對水產品消費的需求。但是，高密度、規模化的養殖也帶來了一些負面影響，如水環境的污染，水產品中各種藥物殘留超標等。水產品體內的藥物會通過食物鏈在生物體內蓄積并最終傳遞到人體，對人的食用安全帶來了潛在危害。

硝基呋喃類化合物是一類人工合成的抗菌藥物。硝基呋喃類化合物在水產品中可迅速代謝，其代謝產物分別為氨基脲(SEM)、3-氨基-2-惡唑烷基酮(AOZ)、1-氨基-2-內酰脲(AHD)、5-甲基嗎啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)，故常通過檢測代謝物殘留水平來反應硝基呋喃類化合物殘留狀況。硝基呋喃類藥物及代謝物均為毒性物質，具有致癌、致畸、致突變等毒副作用。歐盟和美國分別于1995年和2002年禁止在食品和動物生產中使用硝基呋喃類藥物，且歐盟規定每種硝基呋喃類代謝物的最低要求性能水平(minimum?requiredperformance?level，MRPL)為1μg/kg；我國農業農村部也于2002年發布的第193號公告、第235號公告和2005年發布的第560號公告，將硝基呋喃類藥物列為禁用獸藥，嚴禁用于所有食品動物。

雖然我國針對水產品硝基呋喃類代謝物的殘留量測定已經出臺了很多方法標準，如國家檢測標準GB?31656.13-2021(水產品中硝基呋喃類代謝物多殘留的測定液相色譜-串聯質譜法)、農業部1077號公告-2-2008(水產品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定高效液相色譜法)以及農業行業檢測標準農業部783號公告-1-2006(水產品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯質譜法)等。但由于硝基呋喃類代謝物的分子量太小，均需要采用2-硝基苯甲醛在37℃避光化學衍生16h然后再進行檢測。水產樣品的脂肪和蛋白質等干擾物質含量高，需采用溶劑萃取、固相萃取、氮氣吹干、旋蒸濃縮等多種前處理技術進行純化、富集。可見，現有技術中對于硝基呋喃類代謝物的檢測，存在樣品前處理步驟操作復雜、耗時長等缺點。

發明內容

針對現有技術中對于硝基呋喃類代謝物的檢測，存在樣品前處理步驟操作復雜、耗時長等缺點，本發明提供了一種水產品中4種硝基呋喃類代謝物的檢測方法，本發明的方法樣品前處理采用2-吡咯甲醛進行衍生反應，克服了現有的方法衍生時間過長，前處理復雜的缺點；本發明的方法衍生時間短，一步凈化，干擾較少。

本發明首先提供了一種水產品中4種硝基呋喃類代謝物的檢測方法，包括如下步驟：

(1)采用2-吡咯甲醛溶液作為衍生試劑對水產品樣品中4種硝基呋喃類代謝物進行衍生反應，然后采用有機溶劑進行提取，得到待凈化樣品；

(2)對步驟(1)所得待凈化樣品進行凈化，凈化后采用液相色譜串聯質譜儀對其進行檢測。

上述的檢測方法，步驟(1)中，所述2-吡咯甲醛溶液的濃度為0.5～6.0mol/L，優選為1.0mol/L；

所述水產品樣品和所述2-吡咯甲醛溶液的質量體積比為40:3g/mL；

所述有機溶劑為乙酸乙酯。