[發(fā)明專利]一種基于四膜蟲的生物治理藍藻水華方法

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• 申請日: 2022-10-21
• 公開（公告）號: CN115557613A
• 公開（公告）日: 2023-01-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳偉;高磊;王奉景;張鐸;侯鑫彬;吳天月;趙佳琪;周琪
• 申請（專利權(quán)）人: 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C02F3/32
• 分類號: C02F3/32;C12N1/10;C12R1/90
• 代理公司: 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 張曉鵬

1.一種基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)分離純化得到四膜蟲，并進行18S rDNA鑒定；

(2)培養(yǎng)四膜蟲；

(3)四膜蟲饑餓處理：將培養(yǎng)完的四膜蟲加入用于饑餓處理的液體中，饑餓處理24h以上；

(4)吞噬培養(yǎng)：向藍藻中加入經(jīng)過饑餓處理的四膜蟲，四膜蟲吞噬藍藻達到有效減少其生物量的目的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述四膜蟲為四膜蟲種Tetrahymena sp.，經(jīng)18S rDNA鑒定為Tetrahymena mobilis，從污染的銅綠微囊藻培養(yǎng)物中分離純化所得，外觀呈橢圓長梨狀，體長約50μm，身體前端具有口器，全身布滿數(shù)百根長約4-6μm長的纖毛。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述培養(yǎng)四膜蟲的培養(yǎng)條件為：Neff培養(yǎng)基，溫度20-30℃，優(yōu)選為24-28℃；光照20-40μmol m^-2s^-1，優(yōu)選為25-35μmol m^-2s^-1；光暗比15-18h：6-9h，優(yōu)選為16h：8h；培養(yǎng)2-4D。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述Neff培養(yǎng)基的配制方法為：牛肉膏蛋白胨(BPM)5-8g、三氯化鐵儲備液1mL，經(jīng)1L蒸餾水溶解后在121℃、30min下進行高壓滅菌，4℃保存。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，用于饑餓處理的液體包括無菌水、藻類BG11培養(yǎng)基中的一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述饑餓處理的培養(yǎng)條件與四膜蟲的培養(yǎng)條件一致。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述藍藻為銅綠微囊藻。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述吞噬培養(yǎng)中，細胞密度為1.1×10⁷cells mL^-1的藍藻中加入的四膜蟲密度保證為1x10⁴ cellsmL^-1及以上。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所示吞噬培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為：向藍藻中加入經(jīng)饑餓處理的四膜蟲，并將其置于溫度20-25℃，優(yōu)選為23-25℃；光照25-30μmol m^-2s^-1，優(yōu)選為28-30μmol m^-2s^-1；光暗比16h：8h的條件下進行吞噬培養(yǎng)。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于四膜蟲的生物防治藍藻水華方法，其特征在于，所述吞噬培養(yǎng)過程中每天對培養(yǎng)容器搖勻4-5次，使四膜蟲與藍藻混合均勻，充分接觸。