[發明專利]一種純化融合蛋白的方法

在審

• 申請號: 202211293585.1
• 申請日: 2022-10-21
• 公開（公告）號: CN115975046A
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 吳崇兵;顧海濤;姜曉玲
• 申請（專利權）人: 盛禾（中國）生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K1/16
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種純化融合蛋白的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，處理層析填料，上樣；

步驟2，使用平衡緩沖液淋洗；

步驟3，使用洗脫緩沖液洗脫產品，并收集產品；

所述融合蛋白包括第一重鏈、第二重鏈、第一輕鏈和第二輕鏈，所述第一重鏈的一部分和第一輕鏈的一部分、所述第二重鏈的一部分和第二輕鏈的一部分分別配對，且二者之一或全部形成PD-1抗原結合位點，所述第一重鏈還包含細胞因子IL-15片段以及免疫球蛋白Fc部分，所述第二重鏈還包含IL-15受體片段以及免疫球蛋白Fc部分，所述第一重鏈中的細胞因子IL-15片段與第二重鏈中的IL-15受體片段相互結合。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脫緩沖液包含NaAc-HAc、Tris-鹽酸、檸檬酸緩沖液或磷酸緩沖液中的一種或幾種。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述洗脫緩沖液還包含添加劑。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述添加劑選自氨基酸、醇、糖、鹽中的一種或多種。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述氨基酸為精氨酸、甘氨酸、組氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸中的一種或幾種。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述鹽選自NaCl和CaCl₂的一種或兩種。

7.根據權利要求4-6任一項所述的方法，其特征在于，所述添加劑的濃度為10-200mM，優選為20-100mM，更優選為30-80mM。

8.根據權利要求1-7任一項所述的方法，其特征在于，所述洗脫方法為等度洗脫法或線性洗脫法。

9.根據權利要求1-7任一項所述的方法，其特征在于，所述洗脫方法為等度洗脫法。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述洗脫緩沖液包含洗脫緩沖液1和洗脫緩沖液2。