[發(fā)明專利]創(chuàng)制糯性水稻的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211293133.3
• 申請日: 2022-10-21
• 公開（公告）號: CN115850417A
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 任如意;溫鑫;張佳玉;汪凱;曲云;周雪梅;郝愛平;魏繼承
• 申請（專利權(quán)）人: 牡丹江師范學(xué)院
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12N15/84;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 莫舒穎

1.調(diào)控蛋白質(zhì)Wx活性或含量的物質(zhì)，或調(diào)控所述蛋白質(zhì)Wx的編碼基因的表達(dá)的物質(zhì)的應(yīng)用，其特征在于：所述應(yīng)用為下述任一種：

P1、在調(diào)控水稻籽粒直鏈淀粉含量中的應(yīng)用；

P2、在調(diào)控水稻糯性中的應(yīng)用；

P3、在水稻育種中的應(yīng)用；

所述蛋白質(zhì)Wx為如下A1)、A2)或A3)的蛋白質(zhì)：

A1)氨基酸序列是序列表中序列3的蛋白質(zhì)；

A2)將A1)所示的氨基酸序列經(jīng)過一個以上氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由A1)衍生的或與A1)所示的蛋白質(zhì)具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白質(zhì)；

A3)在A1)、A2)或A3)的N末端或/和C末端連接蛋白標(biāo)簽得到的融合蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述蛋白質(zhì)Wx來源于水稻。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述蛋白質(zhì)Wx的編碼基因為如下a1)或a2)或a3)所示的DNA分子：

a1)編碼序列是序列表中序列2所示的DNA分子；

a2)與a1)限定的核苷酸序列具有90％或90％以上同一性，且編碼所述蛋白質(zhì)A的DNA分子；

a3)在嚴(yán)格條件下與a1)或a3)限定的核苷酸序列雜交，且編碼所述蛋白質(zhì)A的DNA分子。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用，其特征在于：所述調(diào)控蛋白質(zhì)Wx活性或含量的物質(zhì)，或調(diào)控所述蛋白質(zhì)Wx的編碼基因的表達(dá)物質(zhì)，為如下c1)-c4)任一種物質(zhì)：

c1)抑制或降低所述蛋白質(zhì)Wx編碼基因表達(dá)的核酸分子；

c2)含有c1)所述核酸分子的表達(dá)盒；

c3)含有c1)所述核酸分子的重組載體、或含有c2)所述表達(dá)盒的重組載體；

c4)含有c1)所述核酸分子的重組微生物、或含有c2)所述表達(dá)盒的重組微生物、或含有c3)所述重組載體的重組微生物。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的應(yīng)用，其特征在于：c1)所述的核酸分子為靶向權(quán)利要求1-3任一所述蛋白質(zhì)Wx編碼基因的sgRNA或表達(dá)所述sgRNA的DNA分子。

6.根據(jù)權(quán)利要5所述的應(yīng)用，其特征在于：所述sgRNA的靶序列為序列1的第996-1018位。

7.一種降低水稻籽粒直鏈淀粉含量或培育糯性水稻的方法，其特征在于，包括通過抑制或降低水稻基因組中權(quán)利要求1-3任一所述的蛋白質(zhì)Wx編碼基因的表達(dá)量來降低水稻籽粒直鏈淀粉含量或培育糯性水稻。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述方法包括向所述水稻中導(dǎo)入降低權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)Wx活性或含量的物質(zhì)，或?qū)虢档蜋?quán)利要求1-3任一所述蛋白質(zhì)Wx的編碼基因的表達(dá)的物質(zhì)；所述降低權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)Wx活性或含量的物質(zhì)，或降低權(quán)利要求1-3任一所述蛋白質(zhì)Wx的編碼基因的表達(dá)物質(zhì)為如下c1)-c4)任一種物質(zhì)：

c1)抑制或降低所述蛋白質(zhì)Wx編碼基因表達(dá)的核酸分子；

c2)含有c1)所述核酸分子的表達(dá)盒；

c3)含有c1)所述核酸分子的重組載體、或含有c2)所述表達(dá)盒的重組載體；

c4)含有c1)所述核酸分子的重組微生物、或含有c2)所述表達(dá)盒的重組微生物、或含有c3)所述重組載體的重組微生物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：c1)所述的核酸分子為靶向權(quán)利要求1-3任一所述蛋白質(zhì)Wx編碼基因的sgRNA或表達(dá)所述sgRNA的DNA分子。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述抑制或降低水稻基因組中權(quán)利要求1-3任一所述的蛋白質(zhì)Wx編碼基因的表達(dá)量為將水稻基因組中的序列1所示的所述蛋白質(zhì)Wx編碼基因替換為為Wx-1基因、Wx-2基因或Wx-3基因；所述Wx-1基因是將序列表中序列1的第1001-1002位的AT替換為TA，保持序列表中序列1的其它核苷酸不變得到的DNA分子；所述Wx-2基因是缺失了序列表中序列1的第1002位的T，保持序列表中序列1的其它核苷酸不變得到的DNA分子；所述Wx-3基因是缺失了序列表中序列1的第1003位的G，保持序列表中序列1的其它核苷酸不變得到的DNA分子。