[發(fā)明專(zhuān)利]一種草酸青霉菌0710-26及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211271653.4
• 申請(qǐng)日: 2022-10-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116376707A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王輝;裴嘉祺;汪輝
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京燦辰微生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/14
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/14;C12N1/02;C12Q1/18;C12Q1/06;C02F3/34;C12R1/80
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• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種草酸青霉菌0710-26，其特征在于，分類(lèi)命名為草酸青霉菌Penicilliutn?oxalicum，該菌株已于2022年6月17日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC?No.40217。

2.如權(quán)利要求1所述草酸青霉菌0710-26的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）取大亞灣區(qū)域海水，采用無(wú)菌水對(duì)海水進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?0¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶，每個(gè)梯度稀釋液取0.1ml涂布在改良馬丁培養(yǎng)基上，30℃培養(yǎng)5-7天；

（2）挑取不同菌落，劃線(xiàn)于改良馬丁培養(yǎng)基上，置于30℃培養(yǎng)3-5天；觀察分離菌落是否純化，若有雜菌，重復(fù)該步驟直至純培養(yǎng)；

（3）將上述純化后的菌株接種于液體培養(yǎng)基中，50-100rpm，30℃振蕩培養(yǎng)3-5天；

（4）取1ml上述菌液接種于20ml指數(shù)生長(zhǎng)的球形棕囊藻培養(yǎng)液中，于20±1℃，12h光照，12h黑暗，2400lux光照強(qiáng)度條件下，培養(yǎng)2天，改良馬丁培養(yǎng)基為對(duì)照加入藻液中，分別設(shè)置3個(gè)平行，檢測(cè)葉綠素a含量，判斷藻細(xì)胞的數(shù)量，從而篩選出有抑藻活性最強(qiáng)菌株為草酸青霉菌0710-26。

3.?如權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，所述改良馬丁培養(yǎng)基組分包括：酵母蛋白胨5.0g，酵母浸出粉?2.0g，葡萄糖?20.0g，磷酸氫二鉀?1.0g，硫酸鎂?0.5g，瓊脂14.0g，純化水1000ml。

4.?如權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)基組分包括：酵母蛋白胨5.0g，酵母浸出粉?2.0g，葡萄糖?20.0g，磷酸氫二鉀?1.0g，硫酸鎂?0.5g，純化水1000ml。

5.權(quán)利要求1所述的草酸青霉菌0710-26在球形棕囊藻治理中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，將草酸青霉菌0710-26進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)得到草酸青霉菌菌液，并將所述菌液應(yīng)用于球形棕囊藻治理。

7.一種制備權(quán)利要求6所述草酸青霉菌菌液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

將草酸青霉菌0710-26接入固體平板培養(yǎng)基中進(jìn)行活化，培養(yǎng)溫度為30-37℃，靜置培養(yǎng)5-7?d；活化后的菌株接入一級(jí)種子培養(yǎng)基中，進(jìn)行一級(jí)種子擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30-37℃，轉(zhuǎn)速100-200?rpm，培養(yǎng)2-4?d；按1-5％的接種量將一級(jí)種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30-37℃，轉(zhuǎn)速50-100rpm，培養(yǎng)2-4d，收集菌液備用。

8.?如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述固體平板培養(yǎng)基組分包括：葡萄糖?1-3%、酵母粉?0.15-0.3%、酵母蛋白胨0.25-0.75%、磷酸氫二鉀0.05-0.15%、瓊脂粉?1-2%、硫酸鎂0.025-0.075%；優(yōu)選為葡萄糖?2%、酵母粉?0.2%、酵母蛋白胨0.5%?、磷酸氫二鉀0.1%、瓊脂粉?1.5%、硫酸鎂0.05%。

9.?如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述一級(jí)種子培養(yǎng)基組分包括：葡萄糖1.5-3%、酵母粉?0.15-0.3%、酵母蛋白胨0.25-0.75%?、磷酸氫二鉀0.05-0.15%、硫酸鎂0.025-0.075%；優(yōu)選為葡萄糖?1.5%、酵母粉?0.2%、酵母蛋白胨0.5%?、磷酸氫二鉀0.1%、硫酸鎂0.05%。

10.?如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基組分包括：葡萄糖?1.5-3%、酵母粉?0.15-0.3%、酵母蛋白胨0.25-0.75%、磷酸氫二鉀0.05-0.15%、硫酸鎂0.025-0.075%；優(yōu)選為葡萄糖?1.5%、酵母粉?0.2%、酵母蛋白胨0.5%、磷酸氫二鉀0.1%、硫酸鎂0.05%。