[發明專利]產生天然殺傷細胞的方法和用于治療癌癥的組合物

在審

• 申請號: 202211266361.1
• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN115710576A
• 公開（公告）日: 2023-02-24
• 發明（設計）人: 樸商佑;金容萬;丁在燮;李龍姬
• 申請（專利權）人: NKMAX有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/0786;C12N5/0781
• 代理公司: 北京市鑄成律師事務所 11313
• 代理人: 呂艷英;陳艷娟

本申請涉及產生天然殺傷細胞的方法和用于治療癌癥的組合物。公開了用于產生天然殺傷細胞的方法。方法包括從血液樣品中分離外周血單核細胞(PBMC)；從PBMC中分離CD56+細胞和/或CD3?/CD56+細胞中的至少一種；和在細胞因子存在的情況下將CD56+細胞和/或CD3?/CD56+細胞中的至少一種與飼養細胞的組合共培養。還公開了用于治療癌癥的組合物。組合物包括由公開的方法產生的CD56+天然殺傷細胞和細胞因子。

本申請為申請日是2019年1月31日、申請號是201980011279.4(PCT/US2019/016076)、發明名稱為“產生天然殺傷細胞的方法和用于治療癌癥的組合物”的中國申請的分案申請。

通過引用并入任何優先權申請

該申請要求2018年2月1日提交的韓國專利申請號KR-10-2018-0012938、2018年2月1日提交的韓國專利申請號KR-10-2018-0012942、2019年1月7日提交的韓國專利申請號KR-10-2019-0001981和2019年1月7日提交的韓國專利申請號KR-10-2019-0001983的權益，其公開內容通過引用以其全部并入本文。

背景

領域

本公開內容涉及用于高純度天然殺傷細胞的制造方法。

相關領域的描述

人體通過由免疫系統協調的免疫應答被保護免受病原體影響，所述免疫系統包括許多免疫相關的細胞、化學介質(chemical mediator)如細胞因子等。白細胞，尤其是淋巴細胞，在這種免疫系統中起著重要的作用。淋巴細胞涉及先天和后天免疫。

天然殺傷細胞(NK細胞)是一類先天免疫細胞，其已知非特異性殺傷癌癥，識別和殺傷病毒、細菌等，并且用酶如穿孔素和顆粒酶或通過Fas-FasL相互作用殺傷病原體。在癌癥患者的情況中，已經報道這些NK細胞的癌細胞細胞毒性的降低與各種類型的癌癥的發作有關，如肺癌(Carrega P等，Cancer，2008:112:863-875)、肝癌(Jinushi M等，J Hepatol.，2005:43；1013-1020)、乳腺癌(Bauernhofer T等，Eur J Immunol.，2003:33:119-124)、子宮癌(Mocchegiani E.等，Br j Cancer.，1999:79:244-250)、血液癌(Tajima F.等，Lekemia 1996:10:478-482)等。因此，對于癌癥療法，期望增加NK細胞的癌細胞細胞毒性。

為了獲得癌細胞的NK-介導的殺傷的治療效果，需要大量具有高純度的NK細胞，但是從癌癥患者獲得大量血液并不容易，并且血液中NK細胞的比例很小，僅為約5％至20％。因此，很難使用NK細胞作為免疫治療劑。

因此，期望僅NK細胞有效地擴增和增殖，但是在NK細胞增殖的常規方法中，需要以高濃度使用各種昂貴的細胞因子，因此相應的療法僅可用于一些財務穩定的患者。此外，根據NK細胞增殖的常規方法，其他類型的免疫細胞(例如，T細胞、B細胞等)可以與NK細胞一起存在，并且包含T細胞的NK細胞的同種異體施用可引起移植物抗宿主病(GVHD)，并且將包含B細胞的NK細胞的同種異體施用給對血型不相容的受試者可導致過客B-淋巴細胞綜合征，因此抗癌效果沒有最大化。

此外，除了擴增和增殖NK細胞，期望高度維持NK細胞的功能，直到實際地使用擴增和增殖的NK細胞。因此，尋求開發這樣的組合物，其能夠促進NK細胞的增殖，增加衍生自NK細胞的細胞因子如TNF-、INF-和GM-CSF的產生和增加NK細胞的癌細胞細胞毒性。

概要