[發明專利]一種組織工程級果膠及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202211259195.2
• 申請日: 2022-10-14
• 公開（公告）號: CN115386017A
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發明（設計）人: 張英;李雙成;高景麟
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: C08B37/06
• 分類號: C08B37/06;A61L27/20;A61K47/36
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

1.一種組織工程級果膠的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)食品級果膠加入超純水中，高速攪拌使果膠完全溶解，果膠溶液濃度為1.0～6.0wt％，攪拌轉速為500～1500rpm，溫度為15.0～60.0℃，攪拌時間1.0～4.0h；

(2)滴加1.0M的NaOH溶液調果膠溶液pH至7.0～8.0，然后進行微濾膜依次過濾，微濾膜孔徑分別為0.8、0.45和0.22μm，去除不溶性雜質，過濾溫度為15.0～60.0℃；

(3)果膠溶液無菌過濾，微濾膜孔徑為0.22μm，過濾溫度為15.0～60.0℃；

(4)在無菌環境中將果膠加入到帶有攪拌裝置的反應器內，并在高速攪拌條件下將1.0M的HCl溶液緩慢加入到果膠溶液中調節pH至1.5～3.0，果膠溶液形成水凝膠，高速攪拌將水凝膠打成細小的顆粒，持續攪拌使凝膠中的內毒素、水溶性蛋白及水溶性色素等雜質溶出；攪拌時間為1.0～4.0h，溫度為室溫；

(5)過濾去除水溶液，收獲濾餅加入1.0M的NaOH溶液溶解水凝膠得果膠溶液，調節溶液pH至7.0～8.0，溫度為室溫；

(6)加入無菌、無內毒素的超純水稀釋果膠溶液至濃度為1.0～6.0wt％，重復1～4次上述步驟(4)和(5)，直至完全去除水溶性的雜質；

(7)果膠溶液加入到帶有攪拌裝置的反應器內，在高速攪拌條件下緩慢加入無水乙醇，使果膠溶液形成凝膠，高速攪拌將凝膠打成細小的顆粒，持續攪拌使凝膠中殘留的內毒素、脂溶性蛋白及脂溶性色素等雜質溶出，乙醇的質量分數為75.0wt％，溫度為2.0～30.0℃，攪拌時間為1.0～4.0h；

(8)過濾去除水溶液，收獲濾餅并加入無菌、無內毒素的超純水溶解，果膠溶液濃度為4.0～15.0wt％，，重復1～4次上述步驟(7)和(8)，直至完全去除脂溶性雜質；

(9)過濾得到的濾餅于-80℃冰箱中冷凍，再進行冷凍干燥，得到白色絮狀產品。

2.一種組織工程級果膠，其特征在于，按權利要求1所述的制備方法制備而成。

3.如權利要求2所述的一種組織工程級果膠，其特征在于，所述組織工程級果膠的蛋白質雜質含量＜0.5mg/g。

4.如權利要求2所述的一種組織工程級果膠，其特征在于，所述組織工程級果膠，色素等雜質去除率＞99.0％。

5.如權利要求2所述的一種組織工程級果膠，其特征在于，所述組織工程級果膠，內毒素含量＜50.0EU/g。

6.一種組織工程級果膠的應用，其特征在于，所述組織工程級果膠在用于制備微囊化細胞移植治療的制劑方面的應用。