[發明專利]一種寬宿主譜變棲克雷伯氏菌噬菌體及其應用和制劑

有效

• 申請號: 202211225639.0
• 申請日: 2022-10-09
• 公開（公告）號: CN115558650B
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發明（設計）人: 王承民;王猛;王雪;趙佳男;曾君;季芳;徐莉莉;邵建立;胡國成
• 申請（專利權）人: 優宜邦生物科技（上海）有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A01N63/40;A01P1/00;A61K35/76;A61P31/04
• 代理公司: 廣東興邦華騰專利代理事務所(特殊普通合伙) 44547
• 代理人: 華淑貞

本申請提供了一種變棲克雷伯氏菌噬菌體pKV?BS375?3.1及其應用和制劑，變棲克雷伯氏菌噬菌體pKV?BS375?3.1的分類學命名為Klebsiella?phage，噬菌體保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC)，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏編號為：GDMCCNo:62637?B1。本申請的噬菌體可應用于制備防治多重耐藥克雷伯氏菌的藥物，且潛伏期短(小于10min)，能快速殺死培養基中的宿主菌，且毒副作用小，安全性高，溫度、酸堿耐受范圍比較廣且具有良好的親水性，易制成噴灑劑和注射劑，對變棲克雷伯氏菌的增殖有良好的抑制、殺滅作用，對感染多重耐藥變棲克雷伯氏菌的動物有很好的治療和保護作用。

技術領域

本發明涉及微生物領域，更具體地，涉及變棲克雷伯氏菌噬菌體及其應用和制劑。

背景技術

變棲克雷伯氏菌( Klebsiella?variicola)是一種機會致病革蘭氏陰性桿菌，屬于腸桿菌科( Enterobacteriaceae)，克雷伯氏菌屬( Klebsiella)，能夠以人類和動物為宿主定殖，可引起人類血液感染、呼吸道感染和尿路感染等疾病，并且研究表明變棲克雷伯氏菌引起的血液感染比由肺炎克雷伯氏菌引起的死亡率更高。變棲克雷伯氏菌作為一種新興的人類病原體，源自于肺炎克雷伯菌復合體，該復合體包括肺炎克雷伯氏菌、準肺炎克雷伯氏菌和變棲克雷伯氏菌，其所有成員都具有重疊的生化和表型特征，但受限于檢測條件，變棲克雷伯氏菌的臨床感染及其實際流行率嚴重低估，實際上，大約20％的被認為是肺炎克雷伯氏菌的人類分離株是變棲克雷伯氏菌或準肺炎克雷伯菌。

近年來，產超廣譜β-內酰胺酶和碳青霉烯酶的變棲克雷伯氏菌分離株的報道逐漸增加。2018年，在中國上海一家教學醫院兒科重癥監護室，從一名2歲女病人的導尿管中發現了 K.variicola?SHET-01株。該菌株表現出高黏液表型(HMV)，表明它極有可能具有高毒性。藥敏試驗結果顯示該菌株對碳青霉烯類抗生素美羅培南、亞胺培南和厄他培南表現出耐藥性，MIC分別為32、32和16μg/mL；有研究報導自中國患者的血液中分離得到一株高毒力表型和多粘菌素抗性的變棲克雷伯氏菌菌株，其質粒攜帶的基因是高毒力表型相關的rmpA和rmpA2因子以及三個鐵載體系統，即aerobactin、salmochelin和yersiniabactin。另外，中國貴州某醫院也有患者在短時間內死于變棲克雷伯氏菌感染的病例報告。變棲克雷伯氏菌引起的感染令臨床管理變得復雜，因此，積極研發針對多耐藥、高毒力變棲克雷伯氏菌的治療策略顯得尤為重要。

噬菌體(Bacteriophage,Phage)能夠高效、特異和專一的針對細菌、真菌和放線菌等宿主微生物感染并造成其裂解死亡，作為一種高生物安全性的天然殺菌物，噬菌體在人類醫學、動物醫學和環境科學等方面具備極大的應用潛力。隨著細菌抗生素耐藥性的廣泛傳播，抗生素治療收效甚微，利用噬菌體遏制耐藥細菌傳播顯示出十分廣闊的應用前景，例如，Ran?Nir-Paz對一例由創傷引起的左脛骨感染患者進行了噬菌體和抗生素治療，該感染由廣泛耐藥鮑曼不動桿菌和多重耐藥肺炎克雷伯菌引起，經過治療，患者避免截肢并接受康復治療；一名62歲糖尿病患者發生人工膝關節感染，臨床逐漸惡化，并對抗生素嚴重過敏，因肺炎克雷伯菌復合物引起的持續性右假肢膝關節感染而接受截肢手術，而噬菌體治療使得局部感染癥狀和體征得以緩解、相關功能得到恢復，且患者未出現與治療相關的不良反應。

發明內容

本申請提供了一株變棲克雷伯氏菌噬菌體及其對多耐藥變棲克雷伯氏菌抑制、殺滅的應用，旨為變棲克雷伯氏菌的感染提供新的治療方案，以及對變棲克雷伯氏菌造成的環境和飼料等污染提供潛在的新型消毒手段。