[發(fā)明專利]一種增強生防貝萊斯芽孢桿菌根際定殖和防效的多功能復(fù)合菌劑的開發(fā)和應(yīng)用

有效

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• 申請日: 2022-09-30
• 公開（公告）號: CN115369064B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李鵬;曹秀蘭;鄭麗
• 申請（專利權(quán)）人: 海南師范大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/20;A01P1/00;A01P3/00;A01P21/00;A01G22/05;A01G13/00;A01G7/06
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 于躍

本發(fā)明涉及一種增強生防貝萊斯芽孢桿菌根際定殖和防效的多功能復(fù)合菌劑的開發(fā)和應(yīng)用。該復(fù)合菌劑由貝萊斯芽孢桿菌HNU24和弗朗克桿菌HNU6?13構(gòu)成。兩株菌均分離自茄子砧木根際土壤，雙菌間存在代謝互養(yǎng)關(guān)系，弗朗克桿菌HNU6?13可以顯著增強貝萊斯芽孢桿菌HNU24的生物膜形成，增強了貝萊斯芽孢桿菌對茄雷爾氏菌的拮抗效果，且雙菌組合可以在番茄根際穩(wěn)定定殖，可協(xié)同作用降低青枯病的發(fā)病率。該復(fù)合菌群還可以顯著增強對鐮刀菌和擬莖點霉的拮抗效果，在防治香蕉枯萎病和檳榔椰子葉斑病也有一定的生防前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)微生物領(lǐng)域，涉及基于混合菌群代謝互養(yǎng)和抗性激發(fā)的根際生物膜共定殖的植物促生復(fù)合菌劑的開發(fā)，其對番茄青枯病、香蕉枯萎和檳榔椰子葉斑病防治有應(yīng)用前景。

背景技術(shù)

由茄雷爾氏菌(Ralstonia?solanacearum，簡稱青枯菌)引起的作物青枯病是一種世界性的植物病害，而且還不斷有青枯菌導(dǎo)致的新病害報道，已有統(tǒng)計表明青枯病已成為世界上第二大植物細(xì)菌病害。青枯病也一直是我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病害之一，據(jù)統(tǒng)計至少在國內(nèi)的30個省份里有青枯病發(fā)生的報道，尤其是在長江流域以南的省份番茄、茄子、辣椒、煙草、花生和生姜等90多種作物時有青枯病發(fā)生，對番茄、茄子、辣椒和煙草等經(jīng)濟作物造成了嚴(yán)重的損失。因此，深入研究青枯菌侵染機制和致病力調(diào)控對于病害的防控具有重要的意義。

微生物是自然界豐富的資源，在農(nóng)業(yè)方面，微生物菌劑具有綠色高效、無污染、無作用、針對性強等優(yōu)點。近年來，合成生物學(xué)成為相關(guān)領(lǐng)域研究熱點，從自然微生物資源庫中，遵循一定的設(shè)計原理，針對某一目的人工組合兩種或兩種以上微生物，使其成為具備一定特定功能的合成微生物群落。相比單一微生物菌劑，合成微生物群落可控性高，穩(wěn)定性好。合成微生物群落在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用正處于起步階段，也將成為未來一段時間內(nèi)合成生物學(xué)相關(guān)方面的主要研究方向。

目前，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域內(nèi)，被研究和開發(fā)最多的微生物種類是芽孢桿菌，我國登記在冊的微生物肥料中，70％以上均屬于此類。芽孢桿菌屬內(nèi)大部分是有益微生物，能夠分泌大量的、不同類型的次級代謝產(chǎn)物，并且其能夠產(chǎn)生芽孢，更容易在復(fù)雜環(huán)境內(nèi)保持活性。以芽孢桿菌為中心，在廣闊的微生物資源庫內(nèi)尋找芽孢桿菌的“激發(fā)劑”，放大芽孢桿菌在生防方面的特性，增加其在植物根際的定殖能力，充分發(fā)揮其強大的促生、抗菌活性，對充分利用微生物制劑在抗病、促生方面具有重大意義。

為了解決茄科作物青枯病的綠色防控問題，本發(fā)明提出一種應(yīng)用雙菌株組合進行防治番茄青枯病的菌液及其應(yīng)用方法。此外，同時發(fā)現(xiàn)該組合菌群還對引起香蕉枯萎病的尖孢鐮刀菌、引起檳榔椰子葉斑病的擬莖點霉等病原菌也具有較好的拮抗效果。鑒于香蕉枯萎病的嚴(yán)重危害性，香蕉在經(jīng)濟作物和糧食作物中的重要地位，同時檳榔和椰子也作為海南地區(qū)重要的經(jīng)濟作物，該發(fā)明具有重要的應(yīng)用價值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種弗朗克桿菌HNU6-13，其特征在于其菌種保藏信息：保藏單位名稱：廣東省微生物菌種保藏中心；保藏單位地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，廣東省科學(xué)院微生物研究所；保藏日期：2022年5月30日；保藏編號：GDMCC?No.62498；分類命名：Franconibacter?pulveris。

本發(fā)明的另一實施方案提供弗朗克桿菌HNU6-13在防治番茄植株青枯病和/或香蕉枯萎病中的應(yīng)用。增強植物根際定殖中的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一實施方案提供弗朗克桿菌HNU6-13在協(xié)同增強貝萊斯芽孢桿菌HNU24防治番茄植株青枯病和/或香蕉枯萎病中的應(yīng)用。增強植物根際定殖中的應(yīng)用。

本發(fā)明的另一實施方案提供一種復(fù)合菌劑，其特征在于該復(fù)合菌劑的有效成分包含貝萊斯芽孢桿菌HNU24、弗朗克桿菌HNU6-13。其中菌量比例優(yōu)選HNU24:HNU6-13＝2:1至10:1。

本發(fā)明的另一實施方案提供一種復(fù)合菌劑，其特征在于該復(fù)合菌劑的制備方法包括如下步驟：