[發(fā)明專利]穩(wěn)定表達外源基因的SINV載體及其制備方法和應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202211213679.3 | 申請日： | 2022-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN116179603A | 公開（公告）日： | 2023-05-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 賈凡;施祥瑋;徐富強 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學院深圳先進技術(shù)研究院 |
| 主分類號： | C12N15/86 | 分類號： | C12N15/86;C12N15/65;C12N15/40;C07K14/18;A61K49/00 |
| 代理公司： | 深圳智趣知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44486 | 代理人： | 崔艷崢 |
| 地址： | 518055 廣東省深圳*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 穩(wěn)定 表達 基因 sinv 載體 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種穩(wěn)定表達外源基因的辛德畢斯病毒載體，其特征在于，所述辛德畢斯病毒載體以pSINV為骨架載體，在所述骨架載體上連接有熒光蛋白基因EGFP和點突變的NSP1基因；
所述辛德畢斯病毒載體上依次連接有UBC啟動子的核苷酸序列、5’UTR、NSP1基因的核苷酸序列、NSP2基因的核苷酸序列、NSP3基因的核苷酸序列、NSP4基因的核苷酸序列、C基因的核苷酸序列、E3基因的核苷酸序列、E2基因的核苷酸序列、6K基因的核苷酸序列、E1基因的核苷酸序列、EGFP基因的核苷酸序列、3’UTR；所述UBC啟動子的核苷酸序列如SEQ?IDNO.5所示；所述5’UTR的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.6所示；所述NSP1基因的核苷酸序列如SEQID?NO.7所示，所述NSP1基因的第853位核苷酸序列由G突變?yōu)锳；所述NSP2基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.8所示；所述NSP3基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.9所示；所述NSP4基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.10所示；所述C基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.11所示；所述E3基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.12所示；所述E2基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.13所示；所述6K基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.14所示；所述E1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.15所示；所述熒光蛋白基因EGFP的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.16所示；所述3’UTR的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.17所示。
2.一種穩(wěn)定表達外源基因的辛德畢斯病毒顆粒，其特征在于，由權(quán)利要求1所述的辛德畢斯病毒載體轉(zhuǎn)染細胞后制備得到。
3.權(quán)利要求2所述的穩(wěn)定表達外源基因的辛德畢斯病毒顆粒的制備方法，其特征在于，使用權(quán)利要求1所述的辛德畢斯病毒載體轉(zhuǎn)染細胞。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述細胞為BHK-21細胞。
5.權(quán)利要求2所述的辛德畢斯病毒顆粒在順向跨多級突觸傳播中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求2所述的辛德畢斯病毒顆粒在非人靈長類神經(jīng)細胞的標記和神經(jīng)環(huán)路示蹤中的應(yīng)用。
7.權(quán)利要求2所述的辛德畢斯病毒顆粒在神經(jīng)科學研究中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述神經(jīng)科學問題包括但不限于以下：
藥物抑制病毒作用機制、病毒復(fù)制和致病機制的分析。
9.權(quán)利要求2所述的辛德畢斯病毒顆粒在制備標記神經(jīng)元的藥物中的應(yīng)用。
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