[發明專利]一種人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體及其在活化擴增人Vδ1 T細胞中的應用

在審

• 申請號: 202211202016.1
• 申請日: 2022-09-29
• 公開（公告）號: CN115724974A
• 公開（公告）日: 2023-03-03
• 發明（設計）人: 何維;蔡孟華;張建民;陳慧;胡愉;許依
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/0783;A61K39/395;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 葉占洋;魯兵

1.一種人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體，其重鏈可變區包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或由其組成，輕鏈可變區包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或由其組成。

2.根據權利要求1所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體，其重鏈恒定區包含SEQ IDNO:9所示的氨基酸序列或由其組成，輕鏈恒定區包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列或由其組成。

3.根據權利要求1或2所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體，其重鏈包含SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列或由其組成，輕鏈包含SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列或由其組成。

4.一種編碼權利要求1-3中任一項所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體的基因；

優選地，其中編碼所述人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體的重鏈的基因包含如SEQ ID NO:13所示的核苷酸序列或由其組成，編碼所述人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體的輕鏈的基因包含如SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列或由其組成。

5.含有權利要求4所述的基因的表達載體、轉基因細胞系和宿主菌。

6.一種制備權利要求1-3中任一項所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體的方法，其包括以下步驟：

1)將鼠源抗人Vδ1TCR單克隆抗體的重輕鏈可變區的氨基酸序列分別與人源化抗體重輕鏈恒定區的氨基酸序列連接，分別得到人源化抗體的重鏈和輕鏈的氨基酸序列；其中所述鼠源抗人Vδ1TCR單克隆抗體的重鏈可變區包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或由其組成，輕鏈可變區包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或由其組成；

2)將步驟1)所得人源化抗體的重鏈和輕鏈的氨基酸序列進行逆翻譯后，分別得到人源化抗體的重鏈和輕鏈的編碼基因；和

3)對步驟2)所得人源化抗體的重鏈和輕鏈的編碼基因進行真核表達，得到所述人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體。

7.權利要求1-3中任一項所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體在活化擴增Vδ1T細胞中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其中所述擴增的方式包括固相化體外擴增；和/或

所述人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體還聯合細胞因子對所述Vδ1T細胞進行活化擴增；可選地，所述細胞因子包括IL-4、IL-12、IL-15、IFN-γ、IL-21、或其組合。

9.權利要求1-3中任一項所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體或由權利要求1-3中任一項所述的人源化抗人Vδ1TCR單克隆抗體擴增獲得的Vδ1T細胞在制備殺傷腫瘤細胞的藥物中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其中所述腫瘤細胞包括但不限于Daudi細胞、K562細胞、OVCAR-8細胞、HepG2細胞和SW480細胞。