[發明專利]一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法

在審

• 申請號: 202211156743.9
• 申請日: 2022-09-22
• 公開（公告）號: CN115322943A
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發明（設計）人: 鄒孟君;劉輝;何騫;申偉;張少恩
• 申請（專利權）人: 成都川哈工機器人及智能裝備產業技術研究院有限公司;成都潮富生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/20;C12N1/02;C12R1/25
• 代理公司: 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220
• 代理人: 唐邦英

1.一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將酸蜂蜜進行稀釋處理獲得菌液；

S2、將步驟S1獲得的菌液接種于乳酸菌液體培養基中，進行多輪馴化培養，獲得待分離菌液，其中，馴化培養為：于34-37℃條件下進行震蕩培養；

S3、將步驟S2獲得的待分離菌液經稀釋后，涂布于含有CaCO₃的乳酸菌分離固體培養基上，進行倒置培養。

2.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，步驟S1中，采用生理鹽水進行稀釋。

3.根據權利要求2所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，步驟S1中，酸蜂蜜的具體稀釋過程為：

將酸蜂蜜置于0.9％生理鹽水中稀釋培養24h，酸蜂蜜和生理鹽水的重量比為1:100。

4.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，步驟S2中，震蕩培養的轉速為60-80rpm。

5.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，步驟S2中，馴化培養8-12輪，每輪時間為24h。

6.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，乳酸菌培養基的pH為6.2-6.4。

7.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，以質量百分比計，乳酸菌液體培養基由以下組分組成：

蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母粉0.5％，磷酸氫二鉀0.2％，檸檬酸氫二銨0.2％，乙酸鈉0.5％，葡萄糖2％，Tween-80 0.1％，MgSO₄·7H₂O 0.058g，MnSO₄·4H₂O 0.025g，余量為水。

8.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，步驟S3中，待分離菌液采用生理鹽水稀釋8-10倍。

9.根據權利要求1所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，步驟S3中，乳酸菌液體培養基中含有CaCO₃和瓊脂。

10.根據權利要求9所述的一種從酸蜂蜜中分離乳酸菌的方法，其特征在于，CaCO₃和瓊脂在乳酸菌液體培養基中的質量占比分別為2％和1.5％。