[發明專利]抗SARS-COV-2納米抗體、制備方法及其應用

在審

• 申請號: 202211143375.4
• 申請日: 2022-09-20
• 公開（公告）號: CN115785264A
• 公開（公告）日: 2023-03-14
• 發明（設計）人: 陳志龍;陳凌;馮波;馮仕林;林曉哲
• 申請（專利權）人: 廈門福宸百奧生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;C12N15/81;C12N1/19;A61K39/42;A61P31/14;C12R1/84
• 代理公司: 廈門律嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 35225
• 代理人: 張輝

1.抗SARS-COV-2納米抗體，其特征在于：

包括抗體1和/或抗體2；

至少兩個所述抗體1/抗體2之間或所述抗體1和抗體2之間由連接子連接起來或與Fc標簽進行融合表達，組成抗SARS-COV-2納米抗體；

所述抗體1的互補決定區由CDR1和CDR3組成；

所述CDR1為SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列，所述CDR3為SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列；

或，所述CDR1為SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，所述CDR3為SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述的抗SARS-COV-2納米抗體，其特征在于：

所述抗體2為SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核酸序列。

3.根據權利要求1所述的抗SARS-COV-2納米抗體，其特征在于：

抗體1還包括高變區HV2、HV4、骨架區FR1、FR2和FR3；

所述HV2為SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列；

所述HV4為SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列；

所述FR1為SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列；

所述FR2為SEQ ID NO.13或SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列；

所述FR3為SEQ ID NO.15或SEQ ID NO.16所示的氨基酸序列。

4.根據權利要求1所述的抗SARS-COV-2納米抗體，其特征在于：

抗體1的氨基酸序列如SEQ ID NO.17或SEQ ID NO.18所示；

所述抗體1的核酸序列如SEQ ID NO.19或SEQ ID NO.20所示。

5.核酸分子，其特征在于：

所述核酸分子包括編碼權利要求1-5任一項所述抗SARS-COV-2納米抗體的核酸序列。

6.重組載體，其特征在于：

所述重組載體包括權利要求5所述的核酸分子；

所述重組載體為畢赤酵母表達載體轉化入畢赤酵母進行表達。

7.重組細胞，其特征在于：

所述重組細胞包括權利要求5所述的核酸分子或權利要求6所述的重組載體。

8.權利要求1-4任一項所述的抗SARS-COV-2納米抗體的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

(1)使用SARS-CoV-2S1蛋白免疫條紋斑竹鯊，分離免疫后條紋斑竹鯊的外周血單核細胞并提取總RNA，以所述RNA為模板逆轉錄制備cDNA；

(2)以所述cDNA為模板，PCR擴增納米抗體可變區，構建噬菌體展示文庫；

(3)在所述噬菌體展示文庫中篩選具有SARS-CoV-2抗原特異性的噬菌體抗體，并進行測序，獲得抗體1和抗體2的核酸序列；

(4)利用抗體1和抗體2的核酸序列，結合連接子或Fc標簽構建表達載體，并轉入細胞進行表達及純化，得到存化后的抗SARS-COV-2納米抗體。

9.藥物組合物，其特征在于：

所述藥物組合物包括權利要求1-4任一項所述的抗SARS-COV-2納米抗體、權利要求5所述的核酸分子、權利要求6所述的重組載體、權利要求7所述的重組細胞中的任意一種或至少兩種的組合；

所述藥物組合物還包括藥學上可接受的載體。

10.如權利要求1-4任一項所述的抗SARS-COV-2納米抗體、權利要求5所述的核酸分子、權利要求6所述的重組載體、權利要求7所述的重組細胞、權利要求9所述的藥物組合物在制備抗SARS-CoV-2藥物中的應用。