[發明專利]一種兔用水溶性復合佐劑的制備方法及應用

有效

• 申請號: 202211114597.3
• 申請日: 2022-09-14
• 公開（公告）號: CN115444933B
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發明（設計）人: 夏夢圓;羅峻;何怡;王芳;羅意;許俊才
• 申請（專利權）人: 貴州福斯特生物科技有限公司;江蘇省農業科學院
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39
• 代理公司: 武漢知律知識產權代理事務所(普通合伙) 42307
• 代理人: 田常娟

本發明公開了一種兔用水溶性復合佐劑的制備方法及應用，屬于獸醫學技術領域。所指水溶性復合佐劑由高分子聚合物、化合物類免疫增強劑、中藥類免疫增強劑、生物類免疫增強劑組成。本發明的有益效果是，與常規鋁膠佐劑、油佐劑相比，不僅能夠刺激機體產生更強的體液免疫和細胞免疫應答，避免了因油佐劑疫苗粘稠引起的注射部位吸收不良，鋁膠佐劑注射局部炎癥反應引起的肉芽腫，且成本較傳統佐劑更低，佐劑來源更穩定。水溶性復合佐劑配苗前后可冷凍保存，可有效提高兔用疫苗的穩定性、安全性和有效性，更好保障養殖戶經濟效益。

技術領域

本發明屬于獸醫學技術領域，具體地說，涉及一種兔用水溶性復合佐劑的制備方法及應用。

背景技術

佐劑通常是指能非特異性地增強機體對抗原的特異性免疫應答的物質。根據其作用機制不同，可將佐劑分為兩大類：一類是免疫刺激性佐劑，如LPS、細胞因子等，對免疫系統的活性細胞呈現直接刺激或活化作用；另一類是抗原遞呈系統(也稱為疫苗傳遞系統，vaccine?deliverysystem，VDS)，如鋁膠、礦物油、脂質體等，可以保護疫苗抗原，延長抗原在機體內的存留時間，從而形成持續的免疫刺激和高效的免疫反應。

兔瘟疫苗常用的傳統佐劑有鋁膠、礦物油、蜂膠等，各有弊端。例如，鋁鹽雖被廣泛應用于疫苗佐劑，但鋁鹽佐劑具有其局限性，僅能誘導體液免疫，刺激機體產生的IgE可能引發機體的超敏反應，且存在鋁鹽制備時不能凍干、制備后不能冷凍、凝膠質量難以控制等局限性；油乳劑可以誘導機體產生強烈而全面地免疫應答反應，但在注射部位會產生過強的炎癥反應，疫苗吸收緩慢，且保存不當容易分層，影響免疫效果；蜂膠佐劑組份較為復雜、來源比較廣泛、批間差異較大，質量難以控制，且在注射部位也會形成腫塊等，這會影響到動物的肉質、外觀等經濟價值。理想的佐劑應是以最小的用量產生最小的刺激，不僅能夠引起機體產生全面而強烈的免疫反應，增強疫苗的免疫原性，且對機體無毒副作用，因此研發高效安全無毒的佐劑是目前亟待解決的問題。

為了豐富了兔用疫苗劑型，減小局部副反應，近幾年學者一直在探索動物疫苗佐劑，且目前兔用水溶性復合佐劑暫未取得突破性進展。

發明內容

1.要解決的問題

針對上述現有技術存在的問題，本發明提供一種兔用水溶性復合佐劑的制備方法及應用，本研究以RHDV?1VP60重組蛋白為基礎，研制兔瘟基因工程復合水佐劑滅活疫苗，進行兔免疫試驗。結果表明，該復合水佐劑疫苗能誘導機體產生RHDV1特異的體液和細胞免疫應答，在免疫吸收、抗體效價、最小免疫劑量及制苗成本方面均優于傳統鋁膠佐劑，可以有效提供對該病的免疫保護作用，具有重要研究開發前景。

2.技術方案

為解決上述問題，本發明采用如下的技術方案。

本發明的目的在于提供一種水溶性復合免疫佐劑。

本發明的另一目的在于提供上述水溶性復合免疫佐劑在制備兔瘟疫苗中的應用。

本發明的又一目的在于提供包含上述水溶性復合免疫佐劑的兔瘟疫苗。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種兔用水溶性復合佐劑，該水溶性復合佐劑中包含卡波姆(Carbopol?971P)，左旋咪唑，新魚腥草素鈉，聚肌胞苷酸(poly?I:C)。

該水溶性復合免疫佐劑中各組分的濃度為：以重量計，卡波姆添加量為1mg/mL-50mg/mL，左旋咪唑的添加量為0.1mg/mL-2.0mg/mL，新魚腥草素鈉添加量為0.3mg/mL-1.5mg/mL，聚肌胞苷酸添加量為0.2mg-1.7mg/mL。

水溶性復合免疫佐劑中各組分母液配制：

(1)左旋咪唑母液：稱取適量鹽酸左旋咪唑干粉溶解于滅菌注射用水中，配制成100mg/mL的獸用鹽酸左旋咪唑液，116℃濕熱滅菌30min后作為左旋咪唑母液，4℃保存備用；