[發明專利]一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法及其應用

有效

• 申請號: 202211096822.5
• 申請日: 2022-09-06
• 公開（公告）號: CN115452799B
• 公開（公告）日: 2023-08-18
• 發明（設計）人: 李洋;孫建平;王蘊鵬;王曉童
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/34;B22F9/24
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 李紅媛

一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法及其應用，本發明涉及一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法及其應用。本發明的目的是為了解決現有藥物成分分析方法復雜、耗時長的問題，本發明用檸檬酸鈉溶液還原硝酸銀生成銀溶膠，加入鹵化物孵育制備增強基底，將增強基底與待測樣品混合，然后加入氯化鈣溶液充分混合，再進行SERS檢測。本發明在血清中檢測小分子藥物具有較好的靈敏度和信噪比，還成功監測了小鼠血清中阿霉素分子的代謝水平并檢測到人血清中樂果的SERS信號，以及可以對血清中藥物進行定量分析，本發明方法具有檢測時間短、高靈敏性、高穩定性和重現性的特點。本發明應用于藥物監測領域。

技術領域

本發明涉及一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法及其應用。

背景技術

對樣品中藥物或其代謝產物進行監測分析，從而可以快速的檢測樣品中的藥物含量并了解藥物的代謝水平，目前藥物監測主要技術為免疫法和色譜法。免疫法中放射免疫法，酶免疫法、熒光免疫法是較常用于血藥濃度監測的方法，免疫法操作簡單，速度快，但易受基質成分、藥物代謝產物和內源性化合物等非目標待測物的干擾。而且不同藥物靶點需要特定的結合分子，這嚴重限制了免疫法的通用性。色譜法中液相色譜串聯質譜法(LC-MS)是目前臨床實驗室TDM檢測的金標準，由于LC的高分離能力和MS的高特異性和靈敏度而被廣泛使用。但該方法設備成本高、樣品制備復雜，并且需要合格且訓練有素的人員。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有藥物監測方法復雜、耗時長的問題，提供了一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法及其應用。

本發明一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法，按以下步驟進行：一、將硝酸銀溶于去離子水中，以1000-2500轉/分鐘的轉速攪拌溶解，得到硝酸銀溶液，然后向硝酸銀溶液中加入檸檬酸鈉溶液，加熱至沸騰后停止加熱，攪拌冷卻至室溫，得到銀溶膠，再將銀溶膠在20℃、5000-10000轉/分鐘的條件下離心10-30min，然后去上清，得到離心產物，然后將離心產物與濃度為1mM的鹵化物溶液在室溫下孵育30-180min，得到增強基底；其中向硝酸銀溶液中加入檸檬酸鈉溶液的方式為直接倒入或滴加，若是滴加到硝酸銀溶液中，則滴加速度為8-12滴/秒；檸檬酸鈉溶液與硝酸銀溶液的體積比為1：(20-40)；離心產物與鹵化物溶液的體積比為1：(0.5-2)；

二、將增強基底與待測樣品混合，然后加入濃度為10m?M的氯化鈣溶液，充分混合，再進行SERS檢測，其中增強基底、待測樣品與氯化鈣溶液的體積比為20：(5-15)：(1-3)。

本發明一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法應用于分析血清中藥物成分。

本發明一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法應用于監測血清中藥物代謝水平。

本發明一種利用表面增強拉曼光譜技術無標簽監測藥物的方法應用于血清中藥物的定量分析。

本發明基于表面增強拉曼光譜(SERS)技術，其增強基底無拉曼信號，得到的信號全部來自樣品本身。該方法檢測速度快(5min)，成本低。本發明可以檢測并區分血清中的不同小分子藥物，還可以監測小鼠血清中阿霉素的血藥濃度，并對其代謝水平進行評估。