[發明專利]一種提高阿卡波糖產量的發酵工藝

有效

• 申請號: 202211092048.0
• 申請日: 2022-09-08
• 公開（公告）號: CN115161365B
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 高蕓;倪峰;劉海良;李輝;邢世華;周昊
• 申請（專利權）人: 上海現代制藥股份有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12N1/20;C12R1/045
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種提高阿卡波糖產量的發酵工藝，涉及生物工程技術領域，方法包括以下步驟：將阿卡波糖生產菌接種于基礎發酵培養基中；25?27℃下發酵；向培養基中加入包括刀豆素A和透明質酸的添加物A，調整參數繼續發酵；向培養基中加入包括N?乙酰神經氨酸、2，5?二巰基?134?噻二唑的添加物B，調整參數繼續發酵；發酵結束后，所得發酵液進行分離提取，得到阿卡波糖。本發明僅通過在發酵過程中在特定時段加入特定添加物，并調整發酵參數（溫度和培養基pH），這樣非常簡單的手段，即可顯著提升阿卡波糖發酵產量，生產和檢測成本大大降低。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，具體涉及發酵技術中的提高阿卡波糖產量的發酵工藝。

背景技術

阿卡波糖(Acarbose)為一種α-葡萄糖苷酶抑制劑，是復雜的低聚糖，其結構類似寡糖，這種非寡糖的“假寡糖”可在小腸上部細胞刷狀緣處和寡糖競爭而與α-葡萄糖苷酶可逆地結合，抑制各種α-葡萄糖苷酶如麥芽糖酶、異麥芽糖酶、葡萄糖淀粉酶及蔗糖酶的活性，使淀粉分解成寡糖如麥芽糖(雙糖)、麥芽三糖及糊精(低聚糖)進而分解成葡萄糖的速度減慢，使蔗糖分解成葡萄糖和果糖的速度減慢，因此造成腸道葡萄糖的吸收減緩，從而緩解餐后高血糖，達到降低血糖的作用。長期服用，可降低空腹血糖和糖化血紅蛋白的濃度。

目前糖尿病已經成為一種常見病，阿卡波糖的市場需求量不斷增加。

目前國內外阿卡波糖的生產都是利用微生物發酵法制備而得到，其中游動放線菌應用的最為廣泛。人們對阿卡波糖產量提升的技術開發，主要集中在誘變選育新菌種以及優化發酵培養基、控制碳源濃度曲線、控制滲透壓等，但目前來講，對發酵培養基現有常見組分的優化已經不能進一步提高產量，控制參數不僅檢測控制方面需要專用設備，設備較為昂貴，且對阿卡波糖產量提升的貢獻并不顯著。

發明內容

未解決上述問題，本發明提供一種通過調整培養基組分，加入新組分及發酵過程中分時段控制培養基組分的方法，以較低的成本，在同等條件下取得了更高的阿卡波糖產量，具體方案如下：

一種提高阿卡波糖產量的發酵工藝，包括以下步驟：

S1、將阿卡波糖生產菌接種于基礎發酵培養基中；

S2、25-27℃下發酵；

S3、向培養基中加入包括刀豆素A和透明質酸的添加物A，調整參數繼續發酵；

S4、向培養基中加入包括N-乙酰神經氨酸、2，5-二巰基-1，3，4-噻二唑的添加物B，調整參數繼續發酵；

S5、發酵結束后，所得發酵液進行分離提取，得到阿卡波糖。

優選地，S1所述阿卡波糖生產菌包括現有公開的可生產阿卡波糖的游動放線菌。

優選地，S1所述基礎發酵培養基包括碳源、氮源、微量元素。

優選地，所述碳源包括葡萄糖、乳糖、麥芽糖中的一種或二種以上。

進一步優選地，所述碳源包括葡萄糖和麥芽糖，二者質量比為(0.7-1.3):1。

優選地，所述氮源包括肉汁、酵母膏、蛋白胨中的一種或二種以上。

進一步優選地，所述氮源包括酵母膏和蛋白胨，二者質量比為1:2。

優選地，所述微量元素包括Na鹽、K鹽、Ca鹽、Mg鹽、Fe鹽、Mn鹽、Zn鹽、Co鹽或Ni鹽中的一種或二種以上。

上述碳源、氮源、微量元素均按照本領域常規培養基濃度進行配制。

優選地，S3所述添加物A中，刀豆素A和透明質酸的質量比為(20-35):1。

優選地，S2所述發酵，初始發酵pH為6.4-6.6。