[發(fā)明專利]一株用于液體發(fā)酵飼料的乳酸片球菌NHB-PaA4及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211079669.5
• 申請(qǐng)日: 2022-09-05
• 公開（公告）號(hào): CN116083274A
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張遨然;趙波;尹望;郭建強(qiáng);王紅梅;周航;蔡熙姮;鄭云凡;李勇;周桂蓮;賈友剛;王向榮;李薇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 新希望六和股份有限公司;成都世紀(jì)投資有限公司;成都楓瀾科技有限公司;四川新希望畜牧科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K35/744;A61P31/04;A61P1/12;A23K10/12;A23K50/30;A23K50/60;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供了一株乳酸片球菌（Pediococcus?acidilactici）NHB?PaA4，該菌分離自仔豬腸道，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC?NO.24435，保藏日期為2022年02月28日。本發(fā)明的乳酸片球菌NHB?PaA4具有顯著的益生性，可有效抑制動(dòng)物常見病原菌的生長(zhǎng)繁殖。本發(fā)明的乳酸片球菌NHB?PaA4可用于豬用液體發(fā)酵飼料的制備，拓寬豬用液體發(fā)酵飼料的微生物菌劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵飼料和液體飼料技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一株用于液體發(fā)酵飼料的乳酸片球菌NHB-PaA4及應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展，集約化養(yǎng)殖已經(jīng)成為主流趨勢(shì)，抗生素的缺失往往會(huì)給養(yǎng)殖者帶來巨大損傷。但是長(zhǎng)期抗生素的濫用導(dǎo)致的細(xì)菌耐藥性和藥物殘留問題日益嚴(yán)峻。目前，飼料行業(yè)已經(jīng)進(jìn)入了全面“禁抗”的時(shí)代，因此替抗產(chǎn)品的開發(fā)和替抗技術(shù)的研究已經(jīng)成為當(dāng)前集約化畜牧業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域的重要課題。

益生菌及其代謝產(chǎn)物具有促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，提高基體免疫力，抑制腸道炎癥，改善腸道菌群結(jié)構(gòu)等作用。因此，由益生菌制成的微生態(tài)制劑成為替抗的主要方式。

乳酸片球菌，拉丁名為Pediococcus?acidilactici，是片球菌屬、乳酸片球菌種。乳酸片球菌具有產(chǎn)酸，調(diào)節(jié)胃腸道菌群，維持腸道微生態(tài)平衡的功能。同時(shí)，其在動(dòng)物體內(nèi)對(duì)病原微生物有拮抗作用，可競(jìng)爭(zhēng)性地抑制病原微生物，因此可將其用于制備液體發(fā)酵飼料。

發(fā)明專利：一株乳酸片球菌NHE-Pa11403及應(yīng)用,申請(qǐng)?zhí)?02110810834.9提供了一種乳酸片球菌NHE-Pa11403，該菌株可有效調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道微生物平衡，促進(jìn)動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的吸收，提高飼料轉(zhuǎn)化率，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。但是，該菌株對(duì)于金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的抑菌效果一般。因此，本發(fā)明提供了一株具有更好抑菌和發(fā)酵效果的乳酸片球菌。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，提供一株用于液體發(fā)酵飼料的乳酸片球菌NHB-PaA4及應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一株乳酸片球菌NHB-PaA4，分類命名為乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)NHB-PaA4，于2022年02月28日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC?NO.24435,保藏地址為中國(guó)北京。

優(yōu)選地，所述乳酸片球菌NHB-PaA4是從自然發(fā)酵食品中分離的乳酸片球菌菌株，通過菌落形態(tài)觀察、分子生物學(xué)鑒定等確定其為乳酸片球菌，其16S?rDNA序列如SEQ?IDNO.1所示。

優(yōu)選地，所述乳酸片球菌NHB-PaA4具有以下微生物學(xué)特征：乳酸片球菌NHB-PaA4是革蘭氏陽性球菌，在MRS瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，培養(yǎng)48h，形成圓形菌落，菌落直徑3-4mm，呈乳白色，表明不光滑，不透明，中間有凸起，邊緣不整齊，菌落形態(tài)如圖1，顯微形態(tài)如圖2，革蘭氏陽性，呈橢球狀，無芽孢，兼性厭氧，生長(zhǎng)適宜溫度范圍為15℃-45℃，最佳生長(zhǎng)溫度為25℃-37℃，生長(zhǎng)pH為3.0-7.5，最適pH為4.0-6.5。

優(yōu)選地，所述乳酸片球菌NHB-PaA4的培養(yǎng)方法如下：

取乳酸片球菌NHB-PaA4(保藏編號(hào)為CGMCC?No.24435)種子液(活菌濃度為10⁹CFU/mL)15mL，接種于350mL搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)；搖瓶發(fā)酵結(jié)束后進(jìn)行100L發(fā)酵罐培養(yǎng)，取700mL搖瓶發(fā)酵種子液接種到100L發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，100L發(fā)酵罐裝液量為70L發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基。發(fā)酵結(jié)束后，檢測(cè)發(fā)酵液活菌數(shù)為4.6×10¹⁰CFU/mL，發(fā)酵液于4℃保存在冰箱內(nèi)備用。