[發明專利]適用于干血斑樣本中維生素D的質譜檢測試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202211075324.2
• 申請日: 2022-09-04
• 公開（公告）號: CN115326993A
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發明（設計）人: 羅水華;陳云;林芳;陳文
• 申請（專利權）人: 湖南新大陸生物技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86;G01N30/88
• 代理公司: 廣東卓林知識產權代理事務所(普通合伙) 44625
• 代理人: 岳帥

1.適用于干血斑樣本中維生素D的質譜檢測試劑盒，其特征在于，包括干血斑取樣片和質譜檢測套件；

所述干血斑取樣片包括能夠打開的外殼和放置在所述外殼內的維生素D凍干片，所述維生素D凍干片中的維生素D的含量為標準值，所述維生素D凍干片的上表面為凹面，且為多孔蜂窩結構；

所述質譜檢測套件包括：標準品、內標溶液、液相色譜洗脫液、蛋白沉淀劑、復溶劑和耗材；

所述標準品用于配置標準濃度的維生素D溶液；

所述標準品的外表面標記有用于配置的濃度和需加入復溶劑的體積，所述標準品內含有與標示濃度匹配的定量的維生素D的凍干粉，加入標示體積的復溶劑后即可配置為標示濃度的維生素D溶液；所述標準品至少有六個，標示濃度從低到高；

所述復溶劑為不含待測維生素D的空白人血清基質。

2.根據權利要求1所述的適用于干血斑樣本中維生素D的質譜檢測試劑盒，其特征在于，所述液相色譜洗脫液包括流動相A和流動相B，流動相A為標準濃度的甲酸水溶液，流動相B為標準濃度的甲酸甲醇溶液。

3.根據權利要求1所述的適用于干血斑樣本中維生素D的質譜檢測試劑盒，其特征在于，所述內標溶液由含有VD3-d6和VD2-d6的同位素內標溶液組成。

4.根據權利要求1所述的適用于干血斑樣本中維生素D的質譜檢測試劑盒，其特征在于，所述蛋白沉淀劑為乙腈和異丙醇的混合液，所述乙腈和異丙醇的體積比為1:1。

5.一種干血斑樣本中維生素D的檢測方法，其特征在于，采用如權利要求1-4任一項所述的檢測試劑盒進行檢測，

步驟1制備干血斑樣本：打開外殼，將全血滴加在維生素D凍干片的上表面，自然干燥后關閉外殼；

步驟2擬合標準曲線方程：分別向每個標準品中加入標示體積的復溶劑，從而配置成標示濃度的維生素D溶液；

分別向上述配置的每份維生素D溶液中加入等量的內標溶液和蛋白沉淀劑；

隨機抽取至少3個標準品使用液質聯用儀檢測，并擬合每一種維生素D溶液所對應的標準曲線方程；

使用液質聯用儀以及得到的標準曲線方程檢測剩余標準品中維生素D溶液的濃度，判斷檢測結果是否在預設的范圍內，如果是，則標準曲線方程有效；

步驟3檢測樣品：取出含有干血斑樣本中維生素D凍干片，使用復溶劑對維生素D凍干片進行復溶制備成待測溶液，使用液質聯用儀以及步驟2中得到的標準曲線方程對待測溶液中的維生素D溶液進行檢測。

6.根據權利要求5所述的一種干血斑樣本中維生素D的檢測方法，其特征在于，標準品和待測樣品中加入的內標溶液的量相同。