[發明專利]一種CD47抗體的試劑組合物及其應用

在審

• 申請號: 202211070211.3
• 申請日: 2022-09-02
• 公開（公告）號: CN115932271A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 韓佳迪;孫菁;程欣;張妍;黃鵬;段清;劉軍
• 申請（專利權）人: 東曜藥業有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/53;C07K16/28
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;張德斌

本發明提供了一種CD47抗體的試劑組合物及其應用。本發明提供的CD47抗體的試劑組合物包括：CD47抗體；以及用于配制緩沖液的試劑，所述緩沖液為含有EDTA和FBS的PBS緩沖液。本發明的試劑組合物可用于準確檢測CD47抗體與細胞結合性能。

技術領域

本發明是關于一種CD47抗體的試劑組合物及其應用，具體而言，是關于一種能夠準確檢測CD47抗體與細胞表面的CD47的結合力的試劑組合物、含有該試劑組合物的試劑盒及相關應用。

背景技術

CD47是一種廣泛表達在細胞表面的約50KD的跨膜糖蛋白，其結構主要包括胞外N端的一個IgV-like結構域，五個高度疏水的跨膜結構域和一個具有多種剪接形式的胞內肽段。CD47因其功能多與整合素相關，因此又被稱為整合素相關蛋白(Integrin?AssociatedProtein,IAP)。CD47在細胞自我識別過程中發揮著重要作用。

信號調節蛋白家族SIRPα是CD47重要的配體。CD47-SIRPα是機體內重要的“自我”識別信號。正常情況下當CD47結合SIRPα時發出“別吃我”信號，SIRPα胞內ITIM招募并激活SHP-1，通過SHP-1抑制下游酪氨酸激酶依賴的信號途徑，調控巨噬細胞，抑制吞噬作用。但這一保護機制易被腫瘤細胞利用。人們最先在卵巢癌中發現CD47，隨后相繼在慢性骨髓白血病、急性髓性白血病、膀胱癌等腫瘤細胞中都發現CD47表達。并且腫瘤細胞中CD47的表達量要遠比正常細胞高，過表達CD47幫助腫瘤細胞免受巨噬細胞的吞噬從而逃過固有免疫系統的監視。腫瘤細胞通過高表達CD47騙過免疫系統，那么在理論上可以通過阻斷CD47-SIRPα信號來促進免疫系統對腫瘤細胞的清除作用。事實上，通過抗CD47或SIRPα抗體來阻斷CD47-SIRPα信號已經被證明確實可以促進腫瘤細胞的清除。因此，CD47作為一個潛在的腫瘤免疫治療靶點受到了廣泛的關注。目前，全球已經有多家公司在投入開發CD47抗體。其中進展較快的是Forty?seven公司開發的Hu5F9。

然而，CD47在體內廣泛表達，腫瘤細胞表面表達CD47抗原，正常紅細胞表面也表達CD47，CD47抗體會影響機體內正常CD47的功能，因此CD47抗體在臨床上出現的副作用成為了抗體開發的巨大挑戰。本領域原有技術運用過程中產生的抗體，起初易出現血凝，隨后出現與紅細胞結合的副作用，這樣就會在臨床上浪費了大量的抗體，并且降低了藥物的安全性，影響了療效，像Hu5F9在臨床試驗中出現了紅細胞毒性，另外還有些抗體表現出了T細胞毒性等。

因此，準確檢測CD47抗體與不同細胞表面的CD47的結合能力是很有必要的。

發明內容

本發明的一個目的在于提供一種檢測CD47抗體結合能力的試劑及相關應用。

本案發明人在研究中發現，在檢測CD47抗體與細胞的結合性能時，所用的流式緩沖液(洗液)將可能會對CD47抗體與細胞的結合性能產生一定的影響，從而有可能影響檢測結果。通過進一步的分析研究，本發明提供了一種能夠準確檢測CD47抗體與細胞表面的CD47的結合力的試劑組合物、含有該試劑組合物的試劑盒及相關應用。

具體而言，一方面，本發明提供了一種CD47抗體的試劑組合物，所述組合物包括：

CD47抗體；以及

用于配制緩沖液的試劑，所述緩沖液為含有EDTA和FBS的PBS緩沖液。