[發(fā)明專利]基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法

在審

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• 申請日: 2021-12-28
• 公開（公告）號: CN115372606A
• 公開（公告）日: 2022-11-22
• 發(fā)明（設計）人: 許行尚;杰弗瑞·陳;王鵬
• 申請（專利權）人: 南京嵐煜生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/96
• 代理公司: 南京正聯(lián)知識產(chǎn)權代理有限公司 32243
• 代理人: 顧伯興

1.一種基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

S1稀釋抗原：將已知純度和濃度的抗原用基質進行梯度稀釋，獲得一系列不同濃度的梯度稀釋液；

S2抗原、抗體孵育反應：向所述步驟S1獲得的每個不同濃度的梯度稀釋液中分別加入等量的抗體標準品或含有抗體的樣品，反應生成混合液；

S3抗原中和當量的確定：向所述步驟S2獲得的每個混合液中加入與所述步驟S1中抗原相對應的特異性抗原檢測試劑進行檢測，記錄數(shù)據(jù)，從而確定抗原中和當量。

2.根據(jù)權利要求1的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，當確定過抗原中和當量的抗體標準品或含有抗體的樣品，需重新確定其抗原中和當量時，則重新進行所述步驟S1～S3獲得該抗體標準品或含有抗體的樣品的抗原中和當量。

3.根據(jù)權利要求2的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，當重新確定該抗體標準品或含有抗體的樣品的抗原中和當量時，所述步驟S1中的抗原為原抗原或與原抗原具有相同的抗原決定簇能被同一種抗體特異性識別的不同抗原。

4.根據(jù)權利要求1的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，所述步驟S3中對每個混合液中加入特異性抗原檢測試劑進行檢測時，當檢測結果中某個稀釋度的混合液出現(xiàn)陰性反應，則確定該混合液對應的稀釋度的抗原量為該標準品或樣品所含抗體的抗原中和當量。

5.根據(jù)權利要求1的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，所述步驟S1中的抗原在不同次數(shù)使用時為具有相同的抗原決定簇，能被同一種抗體特異性識別的相同的或不同的抗原。

6.根據(jù)權利要求1的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，所述步驟S2中向每個不同濃度的抗原稀釋液中分別加入等量的抗體標準品或含有特異性抗體的樣品，經(jīng)37℃恒溫反應30min后，生成混合液。

7.根據(jù)權利要求4的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，所述步驟S1中抗原的梯度稀釋的稀釋度分別為：1：10、1：20、1：80、1：160和1：320。

8.根據(jù)權利要求4的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，還包括步驟S4樣品的抗體滴度的確定：將所述步驟S3中含有抗體的樣品用基質進行梯度稀釋，獲得不同稀釋度的梯度稀釋液；采用抗體檢測試劑對每個稀釋度的梯度稀釋液進行抗體檢測，從而確定樣品的抗體滴度。

9.根據(jù)權利要求8的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，所述步驟S4中含有抗體的樣品用基質進行梯度稀釋的稀釋度分別為：1：2，1：4，1：8，1：16，1：32，1：64，1：128。

10.根據(jù)權利要求8的基于抗原檢測試劑的抗原中和當量的確定方法，其特征在于，所述步驟S4中用抗體檢測試劑對每個稀釋度的稀釋液進行抗體檢測，當檢測結果中某個稀釋度的稀釋液出現(xiàn)了陰性反應，則確定該稀釋液的前一個較高濃度的稀釋液的稀釋度為抗體滴度。