[發明專利]小麥-纖毛鵝觀草抗白粉病T1Sc

在審

• 申請號: 202211045530.9
• 申請日: 2022-08-30
• 公開（公告）號: CN116004885A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 王秀娥;程夢豪;王海燕;王宗寬;袁春霞;王彤;孫麗;肖進
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 冒艷

本發明公開了小麥?纖毛鵝觀草抗白粉病T1Ssupgt;c/supgt;S·1BL易位系的選育方法及分子標記和用途。本發明選育得到的小麥?纖毛鵝觀草易位系T1Ssupgt;c/supgt;S·1BL可用于小麥抗白粉病育種；分子標記的引物可用于鑒定小麥?纖毛鵝觀草結構變異體中是否含有1Ssupgt;c/supgt;短臂染色體，提高抗病育種效率。

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，特別涉及一種小麥-纖毛鵝觀草抗白粉病T1S^cS·1BL易位系的選育方法及其分子標記開發及應用，同時，本發明還涉及所開發的分子標記的擴增體系、該分子標記在小麥遺傳育種中的應用。

背景技術

小麥白粉病是小麥最嚴重的三大真菌病害之一，能造成13—34％的產量損失，嚴重的田塊甚至能導致50％以上的產量損失。

迄今為止，在小麥及其近緣物種中挖掘和鑒定了110余個主效抗白粉病基因，其中68個被正式命名(Pm1-Pm68)(He?et?al.，2021)。此外，利用QTL分析還發現百余個抗白粉病QTLs，分布于小麥21條染色體(Liu?et?al.，2021)。由于長期的育種利用，目前Pm1、Pm3a、Pm3b、Pm3c、Pm3f、Pm4a、Pm5、Pm7以及Pm8等抗性基因在我國已經基本失去抗性。目前，小麥育種家能利用的小麥白粉病抗源仍然缺乏。為克服生產上缺乏可靠的白粉病抗源的嚴峻局面，深度挖掘和利用小麥抗病基因庫，培育小麥抗病新種質，是解決抗源缺乏問題的唯一途徑。

小麥的抗性基因主要來源為小麥及其近緣屬、種。根據親緣關系的遠近，可將其歸類于三類基因庫，即普通小麥的一級、二級和三級基因庫。其中一級基因庫(具有AABBDD染色體組的小麥種)已被國內外多次篩選并大量利用，但是小麥的二級基因庫(具有1～2個與普通小麥相同基因組的物種)和三級基因庫(小麥族內除一級基因庫和二級基因庫以外的種屬，包括19個屬，大約有390個種)中抗白粉病基因還有待進一步的挖掘和利用(劉成等，2020)。在育種利用過程中，來自小麥三級基因庫的優異抗病基因介導的抗性強、持久，同時其載體染色體可能還攜帶其他優異基因，可在小麥遺傳改良中發揮重要作用。

纖毛鵝觀草(Roegneria?ciliaris.2n＝28，S^cS^cY^cY^c)是鵝觀草屬多年生小麥近緣野生物種，是小麥遺傳改良的三級基因庫，其蘊藏著豐富的抗病基因資源，可用于拓寬小麥的遺傳基礎。

發明內容

發明目的：本發明的目的是提供一種小麥-纖毛鵝觀草抗白粉病T1S^cS·1BL易位系的選育方法及分子標記和用途。

技術方案：所述小麥-纖毛鵝觀草抗白粉病T1S^cS·1BL易位系的選育方法，包括：

(1)用⁶⁰Co-γ輻射普通小麥-纖毛鵝觀草二體異附加系DA1S^c正在開花的穗子，并給普通小麥品種南農0686授粉，收獲M₁代種子；

(2)通過基因組熒光原位雜交(Genomic?in?situ?hybridization，GISH)檢測所得到的M₁代種子，鑒定出含有纖毛鵝觀草1S^c外源片段的種子，并獲得了一個含有小麥-纖毛鵝觀草T1S^cS·1BL易位染色體的M₁植株，收獲M₂代種子；

(3)種植鑒定出的含有小麥-纖毛鵝觀草T1S^cS·1BL易位染色體的M₂代種子，利用GISH/FISH(Fluorescence?in?situ?hybridization，FISH)結合分子標記篩選出三種類型：①含純合T1S^cS·1BL，②含雜合T1S^cS·1BL，③不含T1S^cS·1BL。