[發(fā)明專利]吳茱萸堿衍生物在預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202211041420.5
• 申請(qǐng)日: 2022-08-29
• 公開（公告）號(hào): CN115381835A
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡宏崗;沈華星;何世鵬;叢薇;孔祥龍;張楠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/519
• 分類號(hào): A61K31/519;A61P19/10;A61P15/12
• 代理公司: 北京綏正律師事務(wù)所 11776
• 代理人: 呂平

本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體是吳茱萸堿衍生物在預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用，所述的吳茱萸堿及其衍生物的結(jié)構(gòu)如通式I所示，化合物E1為10?羥基?吳茱萸堿，化合物E2為3?胺基?10?羥基?吳茱萸堿。本發(fā)明為吳茱萸堿衍生物E1和E2提供了一種新的功能應(yīng)用，也為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防和治療提供了新的思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，是一種吳茱萸堿衍生物在預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用。

背景技術(shù)

骨質(zhì)疏松癥是一種與年齡相關(guān)的公共衛(wèi)生問題，其特征是一種全身性骨骼疾病，骨密度降低，骨折風(fēng)險(xiǎn)增加。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(PMOP)是一種常見的退行性骨病，威脅著數(shù)百萬絕經(jīng)后婦女的健康。隨著人口老齡化，原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率顯著增加。骨質(zhì)疏松癥導(dǎo)致骨折發(fā)病率提高，對(duì)公眾健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。因此，開發(fā)臨床抗骨質(zhì)疏松藥物至關(guān)重要。

天然產(chǎn)物(NPs)是治療人類疾病藥物豐富的來源。吳茱萸堿(EVO)是傳統(tǒng)中藥吳茱萸的主要成分，具有顯著的抗腫瘤和抗炎活性。盡管EVO最近被證明具有抗骨質(zhì)疏松活性，但低水溶性導(dǎo)致療效不佳。研究人員此前證實(shí)，在EVO的結(jié)構(gòu)中3位或10位引入供電或吸電基團(tuán)可以增強(qiáng)其水溶性并提高其藥理功效。因此，為了提高EVO的抗骨質(zhì)疏松活性，首先合成了10-羥基EVO，通過在a環(huán)位置引入羥基獲得EVO衍生物E1。此外，為了進(jìn)一步提高其抗骨質(zhì)疏松活性，在E1的E環(huán)中引入胺基，獲得3-氨基-10-羥基-EVO E2，以期提高其抗骨質(zhì)疏松藥理活性。

本研究目的是闡明化合物E1和E2在體外破骨細(xì)胞生成中的保護(hù)作用。同時(shí)通過使用卵巢切除術(shù)(OVX)誘導(dǎo)的骨破壞小鼠模型強(qiáng)調(diào)了E2在骨疾病中的治療潛力。

目前尚未有文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)吳茱萸堿衍生物進(jìn)行修飾提高治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效，本研究首次揭示EVO衍生物對(duì)骨代謝的影響。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供兩種吳茱萸堿衍生物，特別是其在預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用。

本發(fā)明在實(shí)驗(yàn)中，通過HE切片和Micro-CT結(jié)果證明吳茱萸堿衍生物可明顯減輕小鼠去卵巢后的骨質(zhì)丟失。

本發(fā)明提供一種吳茱萸堿衍生物在預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的應(yīng)用，所述的吳茱萸堿及其衍生物E1和E2的結(jié)構(gòu)如通式I所示：

附圖說明

圖1.A為EVO、衍生物E1和E2的化學(xué)結(jié)構(gòu)。在體外，我們研究了EVO衍生物對(duì)破骨細(xì)胞前體細(xì)胞的細(xì)胞毒性，B圖顯示在有或沒有指定濃度的EVO衍生物處理96小時(shí)后，通過CCK-8測定評(píng)估的BMM細(xì)胞活力情況。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n＝3)。

圖2.A圖指用RANKL刺激下有或沒有指定濃度的EVO衍生物的BMM分化破骨細(xì)胞的代表性TRAP染色圖像。B和C圖為對(duì)具有3個(gè)或更多核的TRAP陽性多核破骨細(xì)胞的數(shù)量和大小進(jìn)行量化。D為通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)E2處理后破骨細(xì)胞標(biāo)記基因(TRAP、CTSK、DC-STAMP和NFATc1)的相對(duì)表達(dá)水平進(jìn)行檢測。值表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n＝3)；*p0.05，**p0.01，***p0.001。

圖3.A為不存在或存在不同濃度的E2，且在RANKL刺激5天后的肌動(dòng)蛋白環(huán)染色BMM衍生破骨細(xì)胞的代表性熒光圖像。肌動(dòng)蛋白環(huán)和細(xì)胞核分別用TRITC鬼筆環(huán)肽(紅色)和DAPI(藍(lán)色)染色。B和C是對(duì)A的量化，B表示平均細(xì)胞大小，C表示每個(gè)破骨細(xì)胞的平均細(xì)胞核數(shù)。D為不存在或存在不同濃度E2的情況下，成熟破骨細(xì)胞骨吸收的代表性圖像。將用RANKL刺激3天的前破骨細(xì)胞接種到羥基磷灰石涂層的96孔板上，然后用或不用指定濃度的E2再處理3天。用次氯酸鈉去除細(xì)胞，并在光學(xué)顯微鏡下對(duì)骨吸收進(jìn)行成像。E為對(duì)D圖骨吸收面積百分比進(jìn)行量化。值表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n＝3)；*p0.05，**p0.01，***p0.001。