[發明專利]一種改進的臍帶間充質干細胞培養方法及其制備的干細胞和藥物組合物

在審

• 申請號: 202211031662.6
• 申請日: 2022-08-26
• 公開（公告）號: CN116396390A
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 請求不公布姓名
• 申請（專利權）人: 廣州連達科技有限公司
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;C12N5/0775;A61K39/395;A61K35/28;A61P35/00
• 代理公司: 江蘇長德知識產權代理有限公司 32478
• 代理人: 劉維

1.一種NOS2的單克隆抗體5G23，其特征在于輕鏈可變區序列如SEQ?ID?NO：1所示，其重鏈可變區序列如SEQ?ID?NO：2所示。

2.一種NOS2的單克隆抗體5G23在制備用于抑制宮頸癌細胞增殖的藥物組合物中的用途，其中，該抗體的輕鏈可變區序列如SEQ?ID?NO：1所示，其重鏈可變區序列如SEQ?ID?NO：2所示。

3.一種NOS2的單克隆抗體5G23和臍帶間充質干細胞在制備用于抑制宮頸癌細胞增殖的藥物組合物中的用途；其中，該抗體的輕鏈可變區序列如SEQ?ID?NO：1所示，其重鏈可變區序列如SEQ?ID?NO：2所示；所述臍帶間充質干細胞是采用如下方法制備：嬰兒臍帶血采集后用密度為1.077g/ml的Ficoll細胞分離液以2500r/min，30min密度梯度離心后獲得單個核細胞，Ficoll分離液與臍帶血的體積比為1:2，分離后的細胞用IMDM基礎培養基1200r/min，3min離心洗滌3次，調整細胞密度備用；將分離得到的臍血單個核細胞以2x10⁶個/ml密度接種到6孔板中，加入含10％FBS+IL-315μg/L、GM-CSF?5μg/L、G-CSF?5μg/L的IMDM培養基，置37℃，5％CO₂的飽和濕度培養箱中，3天后進行半量換液，去除未貼壁細胞.以后每3天半量換液1次，待細胞融合達85％，用0.125％胰酶、0.02％EDTA消化，按1:2的比例傳代，傳至第三代時將細胞消化，收集細胞即為臍帶血間充質干細胞。

4.如權利要求2-3任一所述的用途，其特征在于所述的藥物組合物中含有藥學上可接受的載體。

5.如權利要求4所述的用途，其特征在于所述藥物組合物包含抗體，并至少包含緩沖液、等滲調節劑、穩定劑和/或表面活性劑中的一種或幾種。

6.如權利要求5所述的用途，其特征在于所述緩沖液選自枸櫞酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液、組氨酸鹽緩沖液或磷酸鹽緩沖液。