[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)聚唾液酸用的補料液及聚唾液酸制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202211023824.1
• 申請日: 2022-08-25
• 公開（公告）號: CN115125278B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發(fā)明（設計）人: 宗劍飛;張小鳳;肖衛(wèi)華
• 申請（專利權）人: 山東合成遠景生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12R1/19
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種生產(chǎn)聚唾液酸用的補料液，含有20g/L～800g/L的碳源，其特征在于，所述補料液含有NaCl；所述補料液中NaCl的濃度范圍為150g/L～200g/L；所述碳源選自葡萄糖、甘油、山梨醇、木糖中的至少一種。

2.根據(jù)權利要求1所述的補料液，其特征在于，所述補料液含有12g/L～300g/L氮源，所述氮源選自玉米漿淀粉、酵母提取物、胰蛋白胨、L-脯氨酸、天冬酰胺、NH₄Cl、(NH₄)₂SO₄中的至少一種。

3.根據(jù)權利要求2所述的補料液，其特征在于，所述補料液中碳源的濃度范圍為60g/L～800g/L，所述補料液中氮源的濃度范圍為50g/L～300g/L。

4.根據(jù)權利要求3所述的補料液，其特征在于，所述補料液中的碳源選自葡萄糖、山梨醇、木糖中的一種；所述補料液中的氮源選自L-脯氨酸、天冬酰胺、NH₄Cl、(NH₄)₂SO₄中的一種。

5.一種利用大腸桿菌生產(chǎn)聚唾液酸的補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，所述補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法包括如下步驟：

F1：將大腸桿菌種子液接種至含發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中；

F2：在32℃～42℃，pH6.4～8.0，攪拌轉速75rpm～700rpm，通氣量0.5vvm～2vvm的發(fā)酵條件下進行發(fā)酵培養(yǎng)；

F3：在步驟F2的發(fā)酵培養(yǎng)過程中，向發(fā)酵罐中流加補料；流加補料的成分包括：NaCl和碳源；所述NaCl的補料量為20g/L發(fā)酵培養(yǎng)基～40g/L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述NaCl的補料速度為，發(fā)酵培養(yǎng)結束前4h～8h NaCl的累積補料量為20g/L發(fā)酵培養(yǎng)基～40g/L發(fā)酵培養(yǎng)基；流加補料的所述碳源選自葡萄糖、木糖 、甘油、山梨醇中的至少一種；所述NaCl采用連續(xù)流加補料或間歇流加補料。

6.根據(jù)權利要求5所述的補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，所述NaCl的補料量為20g/L發(fā)酵培養(yǎng)基～35g/L發(fā)酵培養(yǎng)基；所述NaCl的補料速度為，發(fā)酵培養(yǎng)結束前4h～8hNaCl的累積補料量為20g/L發(fā)酵培養(yǎng)基～35g/L發(fā)酵培養(yǎng)基。

7.根據(jù)權利要求6所述的補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，所述NaCl的補料速度為，發(fā)酵培養(yǎng)結束前9h～10h NaCl的累積補料量為5g/L發(fā)酵培養(yǎng)基～15g/L發(fā)酵培養(yǎng)基；發(fā)酵培養(yǎng)結束前4h～6h NaCl的累積補料量為20g/L發(fā)酵培養(yǎng)基～35g/L發(fā)酵培養(yǎng)基。

8.根據(jù)權利要求5所述的補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟F3中流加補料的成分包括氮源，流加補料的所述氮源選自玉米漿淀粉、酵母提取物、胰蛋白胨、L-脯氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、NH₄Cl、(NH₄)₂SO₄中的至少一種。

9.根據(jù)權利要求8所述的補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟F2的發(fā)酵培養(yǎng)溫度為34℃～42℃，pH為6.4～7.1，攪拌轉速為150rpm～700rpm；步驟F3中流加補料的碳源選自葡萄糖、木糖、山梨醇中的一種；步驟F3中流加補料的氮源選自NH₄Cl、L-脯氨酸、(NH₄)₂SO₄、天冬酰胺中的一種；步驟F3中，流加補料時所用補料液中碳源的濃度為20g/L～800g/L；流加補料時所用補料液中氮源的濃度為12g/L～300g/L。

10.根據(jù)權利要求9所述的補料分批發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于，步驟F3中，流加補料時所用補料液中碳源的濃度為60g/L～800g/L；流加補料時所用補料液中氮源的濃度為50g/L～300g/L。