[發明專利]一種三角梅多倍體種質的創制方法及其應用

在審

• 申請號: 202211005347.6
• 申請日: 2022-08-22
• 公開（公告）號: CN115152626A
• 公開（公告）日: 2022-10-11
• 發明（設計）人: 牛俊海;冷清云;李亞;徐世松;李海燕;黃少華
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院熱帶作物品種資源研究所
• 主分類號: A01H1/08
• 分類號: A01H1/08
• 代理公司: 北京恒律知識產權代理有限公司 11416
• 代理人: 王術娜

本發明涉及一種三角梅多倍體種質的創制方法及其應用，屬于植物多倍體誘導技術領域。本發明提供了一種三角梅多倍體種質的創制方法，將秋水仙素溶液滴加在三角梅幼苗的葉腋處進行染色體加倍，經倍性鑒定后得到的多倍體植株即為所述的三角梅多倍體種質。本發明避免了離體組織培養等復雜的技術環節，誘導周期短，只需將秋水仙素溶液處理三角梅幼苗的葉腋處即可，減少了秋水仙素的使用量，通過調整秋水仙素溶液的具體處理方式和條件，實現了三角梅多倍體種質創制，不僅提高了三角梅多倍體種質的誘導效率，而且處理方法簡單，容易控制和操作，成本低，便于推廣。

技術領域

本發明涉及植物多倍體誘導技術領域，特別是涉及一種三角梅多倍體種質的創制方法及其應用。

背景技術

三角梅(Bougainvillea)，又稱勒杜鵑、九重葛、葉子花等，最早發現于南美洲，是紫茉莉科(Nyctaginaceae)三角梅屬(Bougainvillea)的一種常見的多年生木本植物，現已經廣泛用作觀賞園藝植物，種植在世界各地尤其是熱帶亞熱帶地區。三角梅品種多樣，適應性強，易栽培，花色多，花期長，廣泛應用于園林造景、路橋美化、節慶花展、家庭盆栽等，是產業規模最大的熱帶景觀植物之一。

三角梅屬分布有18個種，其中具有較高觀賞性，應用到園藝栽培中的有光葉三角梅(B.glabra)、毛葉三角梅(B.spectabilis)和秘魯三角梅(B.peruviana)，均為二倍體物種，是栽培品種的重要基因來源。然而，三角梅種間雜交品種、二倍體(2n＝2×＝34)與四倍體(2n＝2×＝34)雜交得到的三倍體雜種F1(2n＝3×＝51)，都存在高度不育的現象，制約了育種工作的持續性開展。主要原因有：(1)三角梅屬不同種間染色體的同源程度低，產生的雜種F1的染色體在減數分裂時不能配對成正常的二價體，低同源性的染色體呈單價體形式存在；(2)種間雜種存在染色體易位、倒位等結構上的變異，形成多價體和單價體；(3)三倍體雜種減數分裂時同源染色體聯會紊亂，不能均等分離。這些均能導致雜種配子的形態結構、細胞學變異和高度不育性。建立染色體加倍的技術體系，能夠獲得更多可育的雜種后代，為三角梅規模化育種掃清障礙。另外多倍化賦予植株莖稈粗壯、花葉巨大、脅迫抗性強等新的優良性狀，產生有育種應用價值的優異新種質。

目前已知三角梅的多倍化主要由兩種途徑產生：(1)自然變異，出現率低，多為嵌合體，不易被發現。(2)離體組織培養誘導產生，周期長、技術步驟繁瑣、設施條件依賴性高、只能針對特定品種等，而且現有的三角梅多倍體的誘導效率很低，遠遠不能滿足開展規?；N對大量可育親本材料的需求，限制了三角梅的育種研究和發展。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種三角梅多倍體種質的創制方法，以三角梅的幼苗作為誘導材料，能夠提高三角梅多倍體種質的誘導效率，同時減少誘導劑的用量，且成本低、簡單易行、處理時間短。

為解決上述技術問題，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了一種三角梅多倍體種質的創制方法，包括如下步驟：

將秋水仙素溶液滴加在三角梅幼苗的葉腋處進行染色體加倍，經倍性鑒定后得到的多倍體植株即為所述的三角梅多倍體種質；所述秋水仙素溶液的濃度為100-500mg/L，所述秋水仙素溶液的處理時間為1-5天。

優選的，所述秋水仙素溶液中含有1-2％的DMSO。

優選的，所述葉腋為三角梅幼苗的子葉葉腋或真葉未長出時兩個子葉中間的生長點。

優選的，所述滴加的次數為每天兩次。

優選的，所述倍性鑒定的對象為染色體加倍處理后萌發的枝條。

優選的，得到的多倍體植株進行所述倍性鑒定的次數≥3次。

優選的，所述三角梅幼苗為三角梅自然授粉或親本雜交、授粉、結實后所得的種子萌發所得。

優選的，所述授粉的花朵為當天開放的花朵。