[發明專利]一種紅白血病小鼠動物模型的構建方法

在審

• 申請號: 202210996639.4
• 申請日: 2022-08-19
• 公開（公告）號: CN115336554A
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 駱衡;莫敏;雅克夫;張越;余佳;程莎
• 申請（專利權）人: 貴州省中國科學院天然產物化學重點實驗室（貴州醫科大學天然產物化學重點實驗室）
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A61K49/00;C12N5/077;C12N7/00
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 范冬冬

本發明提供一種紅白血病小鼠動物模型的構建方法，屬于動物模型構建技術領域。本發明所述構建方法包括以下步驟：收集F?MuLV病毒上清液，將F?MuLV病毒上清液注射到出生48h內的乳鼠中，即得紅白血病小鼠動物模型。本發明所述構建方法操作簡單、成功率高，構建的紅白血病小鼠動物模型存活時間長。

技術領域

本發明屬于動物模型構建技術領域，具體涉及一種紅白血病小鼠動物模型的構建方法。

背景技術

白血病是一類造血干細胞或造血祖細胞的惡性感染性腫瘤，起源于骨髓及血液中異常的不成熟細胞(成髓細胞或成淋巴細胞)，因為惡性增殖、凋亡障礙和分化阻止等因素形成的白血病細胞在骨髓、脾和肝等組織器官中大量增殖積累和廣泛浸潤，并且抑制骨髓的正常造血功能。紅白血病(M6)是急性髓系白血病(AML)中的一種，以紅系異常增生為主要特征，紅白血病在骨髓象中可見紅細胞系顯著增生，幼紅細胞往往大于50％，但是伴有形態異常，表現為巨幼樣變、多核、巨型核、核碎裂等，同時有白細胞系的異常增生。目前白血病發病的具體原因還不明確，遺傳因素和環境因素等風險因子(包括吸煙、電離輻射、既往化療或放療、化學制品和家族遺傳病如唐氏綜合征等)可能參與其中。

紅白血病治療難度大，預后較差，因此針對M6患者探索其發病機制及新的治療手段仍然刻不容緩，需要可靠且擬人度高的白血病模型來支持。國內外制作了大量的白血病動物模型，目前白血病模型制備方法有自發性小鼠白血病和誘發性模型兩種。某些品系小鼠在生長過程中會自發性產生白血病，如6～9月齡AK小鼠的白血病發病率可達60％～90％，多為胸腺來源的淋巴細胞白血病。C58小鼠在6個月后發病率85％以上，多為淋巴細胞白血病。誘發性模型是比較常用的造模方法，主要包括：病毒誘發法、化學致癌劑誘發法、放射輻射誘發法、基因敲除法和可移植性白血病五種。

發明內容

本發明提供了一種紅白血病小鼠動物模型的構建方法，該構建方法操作簡單、成功率高，構建的紅白血病小鼠動物模型存活時間長。

為解決上述技術問題，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供一種紅白血病小鼠動物模型的構建方法，包括以下步驟：收集F-MuLV病毒上清液，將F-MuLV病毒上清液注射到出生48h內的乳鼠中，即得紅白血病小鼠動物模型。

優選的，所述收集F-MuLV病毒上清液的步驟包括：將含有F-MuLV克隆57的NIH-3T3細胞在無血清DMEM培養液中培養，收集細胞，離心，吸取上清液，即得F-MuLV病毒上清液。

優選的，所述含有F-MuLV克隆57的NIH-3T3細胞的培養包括如下步驟：在DMEM培養液、4～7％CO₂、35～40℃條件下培養至細胞長到80～90％，進行2～4次傳代培養，得穩定的含有F-MuLV克隆57的NIH-3T3細胞系。

優選的，所述離心條件包括：600～1000rpm離心3～8min。

優選的，所述F-MuLV病毒上清液的注射方式為腹腔注射。

優選的，所述F-MuLV病毒上清液的注射劑量為80～120μL。

優選的，所述注射F-MuLV病毒上清液的病毒滴度為2000～4000TICD₅₀/mL。

優選的，將注射F-MuLV病毒上清液的乳鼠與母親共養，飼養至3～5周后分籠。

優選的，所述小鼠為BALB/c小鼠。

本發明提供所述的構建方法建立的紅白血病小鼠動物模型在治療白血病藥物篩選中的應用。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

(1)本發明構建方法簡便、成功率高，構建的紅白細胞小鼠模型的存活時間長。